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海莲耐盐基因AOC克隆及转录融合表达载体的构建

Cloning of Salt Tolerant AOC Gene and the Construction of AOC Fused ipt in a Transcriptional Manner

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【作者】 段瑞军郭建春胡新文刘国道符少萍

【Author】 Duan Ruijun Guo Jianchun Hu Xinwen Liu Guodao Fu Shaoping Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology/State Key Biotechnology Laboratory for Tropical Crops, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences Haikou 571101 China

【机构】 中国热带农业科学院热带生物技术研究所热带作物生物技术国家重点实验室中国热带农业科学院热带生物技术研究所热带作物生物技术国家重点实验室 海口571101海口571101

【摘要】 利用RT-PCR的方法从红树林海莲中克隆丙二烯环化氧化酶基因(AOC),并进行序列测定和BLAST程序进行同源序列分析。从RT-PCR得到的产物,其核苷酸序列与GeneBank中海莲丙二烯环化氧化酶基因AO(CBAB21610)的核苷酸序列完全相同。AOC基因通过中间载体pBS-AOC,pJIT60-AOC,最后克隆到植物表达载体pGreenII0229上,得到双35S的pGreenII0229-AOC植物表达载体。AOC基因和ipt基因通过中间载体pBS-AOC,pBS-ipt,pBS-AOC-ipt,pJIT60-AOC-ipt;最后将AOC和ipt基因以转录融合的方式克隆到植物表达载体pGreenII0229上,得到具有双35S启动子的AOC,ipt双基因转录融合的植物表达载体pGreenII0229-AOC-ipt。

【Abstract】 AOC gene was isolated from Bruguiera sexangula (Lour.) Poir by RT-PCR, which has been identified to be homologous to the gene NO: BAB21610 in GeneBank. The AOC, mediated by pBS-AOC and pJIT60-AOC, was cloned onto the plant expression vector pGreenII0229 to construct pGreenII0229-AOC (2S0229-AOC) with double 35S. Mediated by pBS-AOC, pBS-ipt, pBS-AOC-ipt, pJIT60-AOC-ipt, the AOC gene and the ipt gene were fused and transcribed onto the pGreen0229, and the pGreenII0229-AOC-ipt (2S0229-AOC-ipt) with a double 35S promoter was constructed. The isolation of the AOC gene and the construction of the expression vectors are valuable for using the AOC and ipt genes to improve plant traits.

【基金】 教育部重点项目(204158);人事部留学人员科技活动项目;中国热带农业科学院院基金(Rky0526)资助
  • 【文献出处】 热带作物学报 ,Chinese Journal of Tropical Crops , 编辑部邮箱 ,2006年03期
  • 【分类号】Q943.2
  • 【被引频次】3
  • 【下载频次】288
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