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Neuritin在毕赤酵母中的分泌表达与鉴定

Secretary Expression and Identification of Neuritin in Pichia Pastoris

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【作者】 张树军仙玲玲于娜巴鹏飞徐芬杨磊黄瑾

【Author】 Zhang Shujun,Xian Lingling,Yu Na,Ba Pengfei,Xu Fen,Yang Lei,Huang Jin~*(Cooperation Lab of Province Ministry of Education Key Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Disease,Xinjiang Shihezi 832002,China)

【机构】 石河子大学医学院新疆地方与民族高发病重点实验室石河子大学医学院新疆地方与民族高发病重点实验室 新疆石河子832002新疆石河子832002

【摘要】 目的:构建Neuritin的毕赤酵母分泌表达系统,为进一步探讨Neuritin的生物学功能及作用机制奠定基础。方法和结果:在已克隆Neuritin cDNA的基础上,PCR扩增出Neuritin ORF与载体pPIC9k重组,然后利用电击转化将重组质粒pPIC9k-Neuritin导入GS115酵母菌株。筛选出阳性克隆经PCR及测序正确后,用甲醇诱导Neuritin分泌表达;表达产物经SDS-PAGE及Western-blot鉴定。结论:成功构建Neuritin的毕赤酵母分泌表达系统。

【Abstract】 Objective: Construct Pichia pastoris secretory system of Neuritin,set a base for making a further research on function and mechanism of Neuritin.Methods and results:We amplified Neuritin open reading frame from cloned Neuritin cDNA by PCR and inserted it into pPIC9k vector,then transform pPIC9k-Neuritin recombinant into Pichia pastoris GS115.After identifying positive clone by PCR analysis and sequencing,the recombinant was induced by methanol to express Neuritin.The expressed products were analysised by SDS-PAGE and Western-blot.Conclusion:We successfully constructed Pichia pastoris secretory system of Neuritin.

【关键词】 NeuritinpPIC9k巴斯德毕赤酵母基因表达
【Key words】 NeuritinpPIC9kPichia pastorisgene expression
【基金】 兵团博士基金资助项目(NO.2)
  • 【文献出处】 农垦医学 ,Journal of Nongken Medicine , 编辑部邮箱 ,2006年05期
  • 【分类号】Q786
  • 【被引频次】1
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