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水稻白叶枯病菌gacA基因的克隆、测序及敲除研究

Cloning,sequencing and knock-out of gacA gene from Xanthomonas oryzae pv.oryzae

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【作者】 杨万风; 刘红霞; 娄旸; 胡白石; 许志刚; 刘凤权;

【Author】 YANG Wan-feng,LIU Hong-xia,LOU Yang,HU Bai-shi,XU Zhi-gang,LIU Feng-quan~* (Key Laboratory of Monitoring and Management of Plant Diseases and Insects,Ministry of Agriculture,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China)

【机构】 南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室; 南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室 江苏南京210095; 江苏南京210095;

【摘要】 根据黄单胞菌gacA基因的同源性设计简并引物,采用PCR方法从水稻白叶枯病菌(Xanthom onas oryzaepv.oryzae,Xoo)中克隆了gacA同源基因,命名为gacAXoo。序列比较显示,该基因在黄单胞菌中是相对保守的。蛋白质保守结构域搜索表明,GacAXoo属于LuxR家庭的一员,具有与其他GacA蛋白相似的结构。通过同源重组的方法,构建了gacAXoo的插入突变体,为下一步研究gacAXoo的功能奠定了良好的基础。

【Abstract】 A gacA homologue,designated gacA_Xoo,was cloned from the genomic DNA of Xanthomonas oryzae pv.oryzae(Xoo),a bacterium that causes bacterial blight of rice,with degenerated primers by polymerase amplification reaction(PCR).NCBI blast search indicated that GacA_Xoo had a similar structure to that of other GacA proteins,and had conserved domain of LuxR-like proteins.Sequence comparison showed that gacA_Xoo was conserved in the Xanthomonas genus.A gacA_Xoo disruption mutant was successfully generated by a single cross-over event,selected by Amp resistance on NA medium,and confirmed by PCR and Southern blot.This mutant is a useful tool for further study on the function of gacA_Xoo in X.oryzae pv.oryzae.

【基金】 国家自然科学基金项目(30070497);国家高技术研究发展计划(2002AA245041)
  • 【文献出处】 南京农业大学学报 ,Journal of Nanjing Agricultural University , 编辑部邮箱 ,2006年03期
  • 【分类号】S435.111.4
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】291
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