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IPTG诱导浓度、时间及温度对重组促性腺激素释放激素基因表达的影响

Effect of induce concentration, time and temperature of IPTG on the expression of the GST-GnRH/TRS gene

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【作者】 金元昌刘利苏晓艳李景鹏李会东周建红

【Author】 JIN Yuan-chang 1,2, LIU Li3, SU Xiao-yan4,et al(1.Cuangxi University,Nanning 530004,China;2.College of Technological, Hunan University, Xiangtan 411201,China;3.Hezhou University,Hezhou 542800,China;4.Affiliated hospital, Hunan University,Xiangtan 411201,China)

【机构】 广西大学生命科学与技术学院贺州学院湖南科技大学附属医院东北农业大学生命科学学院湖南科技大学生命科学学院湖南科技大学生命科学学院 广西南宁530004湖南科技大学生命科学学院湖南湘潭411201广西贺州542800黑龙江哈尔滨150030

【摘要】 以人工合成的促性腺激素释放激素(gonadotropinreleasinghormone,GnRH)/转运肽(TRS)基因与表达载体pGEX-6p-1相连的重组子(pGE-G)作为研究对象,转化大肠杆菌BL21(ED3)plyS。利用IPTG作为诱导剂,分析比较不同IPTG诱导条件对于表达产物的影响,以确定最佳IPTG诱导条件。结果表明:融合蛋白大部分以包涵体的形式存在,诱导温度为30℃;IPTG浓度为0.2mmol/L时,可溶性融合蛋白GST-GnRH/TRS表达量最大。光密度扫描对表达产物进行初步定量,表明表达产物约占菌体总蛋白的33.3%。

【Abstract】 The object is recombinant GnRH2’S gene and transporter gene with fusion expression vector pGEX-6p-1, transformed into the BL21(ED3) plysS prokaryotic expression system, induced and expressed by IPTG, analyzed the effect of different concentration 、time and temperature of IPTG on the expression of the GST-GnRH/TRS gene, confirmed the best induced condition of IPTG. SDS-PAGE analysis showed that GST-GnRH/TRS expression quantity was the most when temperature of IPTG was 30 ℃ and concentration of IPTG was 0.2 mmol/L. The amount of the goal protein was evaluated by densitometric scanning. It indicated that the product of the GST-GnRH/TRS gene was 33% of total bacterial protein of BL21(ED3).

  • 【文献出处】 黑龙江畜牧兽医 ,Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine , 编辑部邮箱 ,2006年08期
  • 【分类号】Q786
  • 【被引频次】57
  • 【下载频次】1751
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