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简并引物的程序化设计与荔枝HMGR基因片段的克隆

Programming design of degenerate primers and the cloning of litchi HMGR gene fragments

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【作者】 夏瑞陆旺金李建国杜娟

【Author】 XIA Rui1, LU Wang-jin2, LI Jian-guo1*, DU Juan1 (1China Litchi Research Center, South China Agricultural University, Guangzhou,Guangdong 510642 China; 2Guangdong Provincial Key Lab of Post-harvest Science of Fruits and Vegetables, Guangzhou, Guangdong 510642 China)

【机构】 华南农业大学中国荔枝研究中心广东省果蔬保鲜重点实验室华南农业大学中国荔枝研究中心 广州510642广州510642

【摘要】 主要介绍了利用NCBI、DDBJ、Blockmaker、CodeHop和Oligo6.0等数据库和生物软件进行简并引物设计的方法。利用设计的6对简并引物进行RT-PCR,从荔枝(LitchichinensisSonn.)果实中克隆到2个长度分别为510bp和582bp的cDNA片段。通过Blastx检索Genbank进行同源性比对后,发现2片段都与其它植物的HMGR基因具有较高的氨基酸序列同源性。研究表明,该程序化设计的简并引物可信性强,阳性率高,能迅速得到满意结果。

【Abstract】 This paper aims to introduce the method of designing degenerate primers by using some internet databases and biological softwares such as NCBI, DDBJ, Blockmaker, CodeHop and Oligo 6.0. Using the designed 6 pairs of primers to carry out RT-PCR, 2 cDNA fragments with the length of 510 bp and 582 bp respectively were cloned from the litchi(Litchi chinensis Sonn.)young fruit. These 2 fragments were compared in the Genbank by blastx, and the results indicated that the 2 fragments had considerable identities with the HMGR genes of other plants. It is considered that the degenerate primers obtained from this programming design are practicable, and also get satisfied results and high positive rates.

【关键词】 荔枝间并引物程序化设计HMGR基因克隆
【Key words】 LitchiDegenerate primersProgramming designHMGR geneClone
【基金】 国家自然科学基金项目(30370995)。
  • 【文献出处】 果树学报 ,Journal of Fruit Science , 编辑部邮箱 ,2006年06期
  • 【分类号】S667.1
  • 【被引频次】32
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