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新型Taq Man-MGB探针实时荧光定量PCR检测人类mdr1基因

Detection of mdr1 gene by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction using Taq Man-MGB probe

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【作者】 邹亚伟封志纯胡斌乔英飒吴梓梁陈福雄叶铁真

【Author】 ZOU Ya-wei, FENG Zhi-chun, HU Bin, QIAO Ying-sa, WU Zi-liang, CHEN Fu-xiong,YE Tie-zhen Department of Pediatrics, First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical College, Guangzhou 510120, China; DaAn Gene Diagnostic Center, Sun Yat Sen University, Guangzhou 510089, China; Department of Pediatrics, Zhujiang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510282, China

【机构】 广州医学院第一附属医院儿科南方医科大学珠江医院儿科中山大学达安基因诊断中心广州医学院第一附属医院儿科 广东 广州 510120广东 广州 510282广东 广州 510089广东 广州 510120

【摘要】 目的建立一种比现有方法敏感、准确性高、重复性好的人类mdr1基因的新型实时荧光定量PCR检测新方法。方法用Primer Express 2.0引物设计软件设计引物和MGB探针,以Taq Man-MGB探针技术为基础,运用Taq Man-MGB探针,以含有目的基因mdr1cDNA的质粒pHaMDR1/A为阳性模板,建立实时荧光定量PCR检测方法。结果所建立方法的最低检测限度为15个基因拷贝/反应,在待扩增DNA浓度为3.061×103 cps/ml-3.061×109cps/ml范围时,模板浓度与循环阈值(Ct)之间的相关性良好,决定系数r2为0.988243。结论应用Taq Man-MGB探针的实时荧光定量PCR方法检测人类mdr1基因,具有灵敏度高、特异性高和精确性高等优点。

【Abstract】 Primer Express 2.0 software was used to design the primers and the MGB probe. With the plasmid pHaMDR1/A containing mdr1 cDNA as the template, we established a real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction system, which, at the template concentration of 3.061×103 to 3.061×109 cps/ml, had a correlation coefficient of 0.988243 between template concentration and threshold cycle value. This PCR method allows sensitive, specific and quantitative detection of human mdr1 gene.

【基金】 广东省医学科学技术研究基金(2005288)~~
  • 【文献出处】 南方医科大学学报 ,Journal of Southern Medical University , 编辑部邮箱 ,2006年04期
  • 【分类号】Q987-33
  • 【被引频次】11
  • 【下载频次】224
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