小分子干扰RNA靶向抑制suvivin基因诱导U251细胞凋亡的实验研究-中国学术期刊网络出版总库

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小分子干扰RNA靶向抑制suvivin基因诱导U251细胞凋亡的实验研究

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【英文篇名】	Apoptosis of glioma cell line U251 induced by small interfering RNA targeting survivin
【下载频次】	★★★★☆
【作者】	徐如祥; 涂艳阳; 姜晓丹; 封江南; 黄俊;
【英文作者】	XU Ru-xiang; TU Yan-yang; JIANG Xiao-dan; FENG Jiang-nan; HUANG Jun Department of Neurosurgery and Institute of Neuroscience of Guangdong Province; Zhujiang Hospital; Southern Medical University; Guangzhou 510282; China; Gensil Bio-technology Limited Company of Wuhan; Wuhan 430074;
【作者单位】	南方医科大学珠江医院神经外科／广东省神经医学研究所; 武汉市晶赛生物工程技术有限公司; 武汉市晶赛生物工程技术有限公司广东广州; 广东广州; 湖北武汉;
【文献出处】	南方医科大学学报 , Journal of Southern Medical University, 编辑部邮箱 2006年 04期期刊荣誉：中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊 CJFD收录刊
【中文关键词】	小分子干扰RNA; suvivin基因; 胶质瘤; U251细胞; 细胞凋亡;
【英文关键词】	small interfering RNA; suvivin; glioma; U251 cells; apoptosis;
【摘要】	目的构建靶向survivin基因的小分子干扰RNA(siRNA)表达载体,导入人胶质瘤细胞U251中,研究siRNA靶向抑制survivin基因对U251细胞的凋亡诱导作用。方法根据siRNA设计原则,在survivin全长序列中选取设计含19个核苷酸(19nt)靶序列两条反向重复序列,间以9个核苷酸的茎环序列,两端分别加上对应的酶切位点,形成siRNA的 DNA模板并克隆到siRNA表达载体pGenesil-1中,获得靶向抑制survivin基因的siRNA表达载体pGenesil-1／survivin; 采用Metafectene转染试剂将干扰质粒导入到胶质瘤细胞U251;分别采用实时荧光定量PCR以及Western bloting从 mRNA和蛋白水平检测干扰效果;采用Annexin-V／PI双色标记的流式细胞仪法检测siRNA诱导的细胞凋亡。结果实时荧光定量PCR以及Western blotting显示:survivin基因的mRNA转录水平以及蛋白水平的表达均得到显著抑制;流式细胞仪检测结果显示:survivin基因表达被抑制后,U251细胞凋亡率明显增高。结论靶向survivin基因的重组siRN...
【英文摘要】	Objective To construct recombinant expression vectors of small interfering RNA (siRNA) targeting survivin and investigate apoptosis of glioma cell line U251 mediated by the survivin-targeting siRNA. Methods According to the sequence of the coding region of survivin gene, two strings of 19 nucleotides of inverted sequence flanking the loop sequence of two complementary 9-base oligonucleotides were designed and synthesized to form hairpin construct as the DNA templates for the target siRNA. The siRNA template...
【基金】	国家自然科学基金(30170961)~~
【更新日期】	2006-06-20
【分类号】	R739.41
【正文快照】	肿瘤的基因靶向治疗是目前肿瘤生物治疗研究的热点领域之一。肿瘤基因靶向治疗的策略包括肿瘤相关基因(tllmor一associated antigen，TAA)诱导的特异性细胞毒T淋巴细胞的过继免疫治疗，这类TAA抗原须高度选择性表达于肿瘤细胞而不表达或低表达于正常组织和细胞[1砚味采用?

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