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沙拐枣DNA提取方法改进及PCR扩增检测

Improvement of DNA extraction method and PCR test of Calligonum mongolicum

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【作者】 潘和平; 晋玲; 高天鹏; 张晓苏; 常根柱; 时永杰; 杨具田;

【Author】 PAN He-ping~(1,4),JIN Ling~2,GAO Tian-peng~3,ZHANG Xiao-su~4,CHANG Gen-zhu~5,SHI Yong-jie~5,YANG Ju-tian~4(1.Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070;2.Cold and Arid Regions Environmental and engineering research Institute,Lanzhou 730000;3.College of Life Science,Lanzhu University,Lanzhou 730000;4.College of Life Science,Northwest University fornationalities,Lanzhou 730030;5.Lanzhou Institute of Animal Husbandry and Veterinary Pharmaceutical Science,CAAS,Lanzhou 730050)

【机构】 甘肃农业大学动物科技学院; 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所; 兰州大学生命科学院; 西北民族大学生命科学与工程学院; 中国农科院兰州畜牧与兽药研究所; 西北民族大学生命科学与工程学院 甘肃兰州730070; 甘肃兰州730030; 甘肃兰州730000; 甘肃兰州730050;

【摘要】 利用改进的提取沙拐枣Calligonum mongolicumDNA的CTAB方法,从沙拐枣当年鲜根提取总DNA,以琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测,并进行PCR扩增试验。结果显示,所提取的DNA片段大小在20 kb以上,OD260/OD280比值为1.880~1.900,OD260/OD230比值为2.000~2.040,DNA的浓度0.380~0.470μg/mL,DNA纯度较高,可直接用于随机扩增的DNA多态性(RAPD)标记,条带清晰、迁移率低而整齐。

【Abstract】 DNA was extracted from fresh root of Calligonum mongolicum using an improved method of CTAB,and examined by agarose gel electrophoresis,UV-spectrophotometer and PCR.The results showed that DNA fragment extracted by this method was larger than 20 kb,and ratios of OD260/OD280 and OD260/OD230 were 1.880~1.900 and 2.000~2.040,respectively.The concentrations of DNA were 0.380~0.470 μg/mL.The higher purity DNA can be directly used in RAPD with clear bands and low transferring rate.

【关键词】 沙拐枣鲜根; DNA; 提取; PCR;
【Key words】 Calligonum mongolicum; DNA; extraction; PCR;
【基金】 甘肃省自然科学基金(ZS031-A25-051-D)
  • 【文献出处】 草业科学 ,Pratacultural Science , 编辑部邮箱 ,2006年10期
  • 【分类号】S793.1;Q943.2
  • 【被引频次】12
  • 【下载频次】264
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