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多药耐药基因转染脐血单个核细胞及其表达与功能的体外研究  
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【英文篇名】 Multidrug resistant gene transfer into human cord blood mononuclear cells in vitro and its expression and function
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【作者】 安淑华; 金先庆; 康权; 郭春宝; 王佚; 王珊; 许嘉陵;
【英文作者】 AN Shuhua; JIN Xianqing; KANG Quan; GUO Chunbao; WANG Yi; WANG Shan; XU Jialing. Children's Hospital; Chongqing University of Medical Sciences; Chongqing 400014; China;
【作者单位】 重庆医科大学附属儿童医院; 现在河北省儿童医院; 400014;
【文献出处】 中华儿科杂志 , Chinese Journal of Pediatrics, 编辑部邮箱 2002年 11期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 基因; MDR; 转染; 胎血; 白细胞; 单核;
【英文关键词】 Genes; MDR; Transfection; Fetal blood; Leukocytes; mononuclear;
【摘要】 目的　为克服白血病化疗中的骨髓抑制 ,采用含人多药耐药 (MDR1)基因全长cDNA逆转录病毒载体转染人脐血单个核细胞 ,探索一种MDR1基因导入脐血造血细胞稳定、有效的方法 ,评价MDR1基因转染脐血细胞及其功能的表达 ,为体内转染MDR1基因保护骨髓免受大剂量化疗药物损伤提供条件。方法　采用含有MDR1基因表达质粒pHaMDR1/A的包装细胞PA3 17传代培养产病毒法 ,通过浓缩病毒上清液将MDR1基因导入人脐血单个核细胞 ,应用聚合酶链反应 (PCR)方法、免疫组化法、流式细胞学等方法从基因、蛋白质、功能及细胞生物学特性等不同水平检测MDR1基因在脐血单个核细胞的表达、转染率及其与转染时间的关系和功能的表达 ;转染行为是否影响脐血细胞生物学特性。结果　 (1)建立了一种安全可行、稳定高效的MDR1基因体外转染脐血造血细胞的体系和方法 ;(2 )PCR方法证实外源性MDR1基因可有效地在体外整合到脐血单个核细胞中 ;(3 )免疫组化法测得 2日、4日、6日转染率分别为 18 0 %、2 9 8%、3 4 7% ;(4 )柔红霉素排出试验证实导入的MDR1基因表达产物P gp有正常的生物学功能 ;(5 )...
【英文摘要】 Objective The investigators aimed to transfer multidrug resistant (MDR1) gene into hematopoietic cells of human cord blood mononuclear cells (CBMNC) by a retrovirus vector containing a full-length cDNA of human MDR1 gene and explored a secure, stable and efficient method. The authors also attempted to assess the safety, feasibility and functional expression of transferred MDR1 gene into cord blood mononuclear cells in vitro and provided with favorable conditions for protecting bone marrow hematopoietic cel...
【基金】 国家自然科学基金资助 (30 0 70 81)
【分类号】 R346
【正文快照】 多药耐药 (ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ,ＭＤＲ)最主要的原因是Ｐ 糖蛋白 (Ｐ ｇｐ)在细胞中过度表达将药物外排[1] 。Ｐ ｇｐ是由多药耐药ＭＤＲ1基因编码产生的分子量为 170 0 0 0的跨膜糖蛋白 ,是ＡＴＰ依赖性外排泵[2 ] ,它能将抗癌药物从肿瘤细胞内泵出 ,使?

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