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杂色云芝组成型漆酶Ⅰ的纯化和底物专一性

Purification and Substrate Specificity of a Constitutive Laccase Ⅰ from a White-rot Fungus Trametes versicolor

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【作者】 李杨段新源刘稳方靖高培基

【Author】 LI Yang, DUAN Xin yuan, LIU Wen, FANG Jing, GAO Pei ji * (State Key Laboratory of Microbial Technology,Shandong University,Jinan 250100,China)

【机构】 山东大学微生物技术国家重点实验室山东大学微生物技术国家重点实验室 济南250100济南250100济南250100

【摘要】 采用合成培养基培养杂色云芝As5 4 8,从发酵液中纯化出一种组成型漆酶同功酶Ⅰ .经超滤浓缩 ,DEAE SephadexA 5 0离子交换层析 ,Bio gelP 10 0凝胶过滤纯化了该酶 .SDS PAGE分析发现 ,该酶分子量为 6 8kD ,薄层等电聚焦测得等电点为 3 5 .漆酶Ⅰ的底物范围较宽 ,以O2 为电子受体 ,可以氧化多种木素单体模型物 ,包括 2 ,6 二甲氧基酚 ,2 ,2′ 联氮 二 (3 乙基 苯并噻唑 6 磺酸 )(ABTS) ,愈创木酚 ,咖啡酸 ,阿魏酸和邻联茴香胺 .结果表明 ,该酶在木质素的生物降解中可能有重要的作用和应用价值 .

【Abstract】 A constitutive laccase Ⅰ (EC 1.10.3.2) isolated from Trametes vesicolor As5.48 was purified to electrophoretic homogeneity by ultrafiltration, DEAE Sephadex A50 ion exchange chromatography and gel filtration on Bio gel P 100. The molecular weight of the enzyme was 68 000 determined by SDS PAGE and the isoelectric point was estimated to be pH 3 5 by IEF. The enzyme has a wide range of substrates in the presence of oxygen as the electron receptor, including 2,6 dimethoxyphenol, ABTS, guaiacol, caffeic acid, ferulic acid, o dianisidine.The results indicates that the enzyme may play an important role in lignin degradation.

【基金】 国家自然科学基金资助项目 (No.2 0 0 770 15 );国家优秀博士论文基金资助项目~~
  • 【文献出处】 中国生物化学与分子生物学报 ,Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology , 编辑部邮箱 ,2002年06期
  • 【分类号】Q554
  • 【被引频次】24
  • 【下载频次】228
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