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热稳定性过氧化氢酶工程菌株发酵条件的研究

Study on Culture Conditions of Engineered Strain of Thermostable Catalase

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【作者】 王凡强王正祥邵蔚蓝刘吉泉徐成勇诸葛健

【Author】 Wang Fanqiang Wang Zhengxiang Shao Weilan Liu Jiquan Xu Chengyong Zhuge Jian (Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Southern Yangtze University, Wuxi, 214036)

【机构】 江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室江南大学生

【摘要】 重组大肠杆菌UM2 1携带来自嗜热脂肪芽孢杆菌过氧化氢酶的基因 ,在以IPTG作为诱导物时 ,在IPTG浓度为 0 75mmol/L、起始 pH6 5、装液量 5 0mL/2 5 0mL三角瓶的条件下 3 7℃诱导 3h ,酶的表达水平最佳 ;在以乳糖作为诱导物时 ,在乳糖质量浓度为 10 g/L、起始 pH7 5、装液量 5 0mL/2 5 0mL三角瓶的条件下 ,3 7℃诱导 5h ,酶的活力最高。乙酸的存在能够抑制酶的表达。工程菌在最适条件下酶活力可达 3 0 0 0 0~ 3 5 0 0 0U/L以上 ,约是原始菌株嗜热脂肪芽孢杆菌的 10倍。工程菌在无选择压力的条件下连续传代 60代 ,基本保持稳定 ,连续传代 10 0代 ,仍有 80 %左右的菌株携带重组质粒。

【Abstract】 The recombinant E coli carried catalase gene from Bacillus stearothermophilus  The conditions for expressions of recombinant catalase were reported in this paper For expression of catalase using IPTG (isopropyl β D thiogalactoside) as an inducer, the best conditions were: IPTG concentration, 0 75?mmol/L; inducing time, 3 hours; inducing temperature, 37℃; initial pH, 6 5, broth volume, 50?mL/250?mL flask For expression of catalase using lactose as an inducer, the best conditions were: lactose concentration, 10?g/L; inducing time, 5 hours; inducing temperature, 37℃; initial pH 7 5, broth volume, 50?mL/250?mL flask The recombinant plasmid was stable after cultivation in LB broth at 37℃for 60 generations without antibiotic selection Under optimal conditions, the catalase activity reachs up to 30~35 U/?mL,which is about tenfold that of Bacillus stearothermophilus 

【关键词】 过氧化氢酶工程菌培养条件
【Key words】 catalaseengineered strainculture conditions
  • 【文献出处】 食品与发酵工业 ,Food and Fermentation Industries , 编辑部邮箱 ,2002年02期
  • 【分类号】TQ920
  • 【被引频次】29
  • 【下载频次】215
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