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35S标记重组植物钙调素的制备方法
Preparation of Plant Recombinant 35S-Calmodulin in E.coli
【摘要】 利用3 5S标记的氨基酸混合物喂养工程菌 ,成功地制备了3 5S标记的拟南芥钙调素亚型 2 (3 5S ACaM2 ) ,对其纯度、放射活度、电泳行为及其灵敏性等进行了检测 .结果表明从工程菌中制备的3 5S ACaM 2纯度高、放射活度高、Ca2 + 与EGTA存在时的电泳行为与未标记的ACaM2相同 ,可作为一种高灵敏性的探针用于检测钙调素结合蛋白
【Abstract】 S ACaM2 was producted by using 35 S labeled amino acid mixture in E.coli . SDS PAGE and autoradiograph indicated that high purified, high specific radioactivity 35 S ACaM2 was obtained.Electrophoresis character of 35 S ACaM2 is the same as that of unlabeled ACaM2 with Ca 2+ or EGTA. Dot blot and NC overlay experiment showed that 35 S ACaM2 could be used to detect calmodulin binding proteins as a sensitive probe.
【基金】 家重点基础研究资助项目 (G19990 1170 2 );国家杰出青年基金资助项目 (3 0 0 2 5 0 2 4)~~
- 【文献出处】 生物化学与生物物理进展 ,Progress In Biochemistry and Biophysics , 编辑部邮箱 ,2002年05期
- 【分类号】Q946
- 【被引频次】2
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