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hTCF4酵母双杂交载体的构建

Construction of hTCF4 Yeast Two-Hybird Vector

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【作者】 林桂亭张志文藏桐辛殿旗郭应禄

【Author】 LIN Gui ting,ZHANG Zhi wen,ZANG Tong,XIN Dian qi,GUO Ying lu (Urology Institude of Bejing Medical University,Beijing 10034,China)

【机构】 北京医科大学第一医院泌尿外科北京医科大学生理学系北京医科大学第一医院泌尿外科 北京100034北京100034北京100034

【摘要】 目的 研究Wnt Frizzled信号传导通路上的主要信号分子T细胞因子 (TCF4)在细胞核内转导的辅激活物和辅阻遏物。方法 通过PCR法以真核表达载体pCDNA TCF4为模板 ,扩增获得了15 0 0bp的TCF4基因的末端及DNA结合域片段 ,经过SalI ,NotI酶切后 ,基因重组的方法定向克隆于酵母双杂交载体pPC86和pDBleu中 ,构建形成pDBleu TCF4和pPC86 TCF4真核表达载体。结果 经转化 ,提取质粒酶切鉴定表明构建成功。结论 hTCF4酵母双杂交载体的构建成功为Wnt Frizzled信号通路的深入研究奠定了基础。

【Abstract】 Objective To investigate the coactavitor and corepressor in nuclei of hTCF 4,which is the important molecule of Wnt/Frizzled signaling pathway.Method We got the TCF 4 ND fragment from pCDNA TCF 4 by polymercase reaction(PCR).After digestion by Sai I and Not I,TCF 4 ND fragment were subcoloned into Yeast Two Hybird vector pPC86 and pDBleu.Result At last,hTCF 4 yeast two hybird vectors pPC86 TCF 4 and pDBleuTCF 4 were constructed and confined by RE digestion.Conclusion The construction of pPC86TCF 4 and pDBleuTCF 4 are helpful to the studying of Wnt/Frizzled pathway.

【关键词】 酵母双杂交载体亚克隆hTCF4pDBleuTCF4pPC86TCF4
【Key words】 hTCF 4 Yeast Two HybirdVectorpPC86 TCF 4pDBleu TCF 4Subclone
  • 【文献出处】 潍坊医学院学报 ,Journal of Weifang Medical College , 编辑部邮箱 ,2002年01期
  • 【分类号】R346
  • 【下载频次】86
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