alc基因开关系统在水稻中的建立和优化

【摘要】 对以构巢曲霉的ale调控元件为基础构建的酒精诱导系统（alc系统）在转基因水稻中调控GUS编码基因的表达进行了详细研究.结果表明,在转基因水稻中,非诱导状态下alc系统控制下的报告基因没有表达;通过根部浇灌方式施加酒精后则可诱导报告基因的表达.ale系统的表达活性依赖于酒精浓度:0.1％的酒精不能诱导ale系统,而0.5％的酒精可使GUS活性提高大约70倍,2％的酒精浓度下ale系统的表达活性最高,是诱导前的120倍左右;并且这些浓度的酒精对水稻均未观察到生理毒害作用.酶动力学研究表明,诱导48h后,GUS编码基因开始表达;96h后,GUS活性达到最高,可达诱导前的130倍左右;120h后GUS活性开始降低.对诱导前后的叶片进行组织化学染色检测,结果也证实alc系统可以严谨地控制外源基因在水稻中的表达.更多还原