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黑曲霉T21 glaA 5'上游调控区DNA与蛋白因子的相互作用分析  
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【作者】 仇润祥; 朱兴国; 刘丽; 唐国敏;
【作者单位】 中国科学院微生物研究所; 中国科学院微生物研究所 北京;
【文献出处】 中国科学(C辑:生命科学) , Science in China,Ser.C, 编辑部邮箱 2002年 02期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 黑曲霉糖化酶; 电泳迁移率变动分析; 蛋白结合因子; DNase I足印分析;
【摘要】 以糖化酶生产菌株黑曲霉T21(Aspergillus niger T21)的糖化酶基因(glaa)5'cis调控区片段为探针,采用电泳迁移率变动分析(EMSA)法,从黑曲霉蛋白粗提液中检测到与glaA 5'调控区特异结合的蛋白因子,并把其结合DNA定位在T21 glaA 5'调控区的-374~-344,-484~-414以及-580~-540 bp 3个区段,且此3个结合DNA的片段在EMSA实验中呈现交叉竞争,表明这3个DNA区段可与同一个蛋白因子相结合.以-374~344 bp序列为探针的紫外交联实验表明,该蛋白因子的分子量(或亚基分子量)约为10ku.利用DNase I足印分析确定了此蛋白因子在前两个区段的精细结合部位,并对其结合序列的特性进行了分析.
【基金】 国家自然科学基金资助项目(批准号:39870015)
【分类号】 Q933
【正文快照】 丝状真菌基因表达调控研究多以构巢曲霉(AsPePillu nidulans)和粗糙链抱霉(NeuroSPoracrassa)等模式微生物为研究对象,已经分离和鉴定了不少调控蛋白.但有重要应用价值的工业丝状真菌,因其遗传背景不清增加了基因表达调控研究的难度.目前的研究主要集中在对高表达基因*调?

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