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用铀试剂Ⅰ共振光散射法测定蛋白质的研究

Study on Determination of Protein with ArsenazoⅠ Using Resonance Light Scattering Technique

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【作者】 李树伟; 李娜; 赵凤林; 李克安;

【Author】 LI Shu wei, LI Na,ZHAO Feng lin,and LI Ke an College of Chemistry and Molecular Engineering, Peking University,Beijing 100871,China

【机构】 北京大学化学与分子工程学院; 北京大学化学与分子工程学院 北京100871; 北京100871; 北京100871;

【摘要】 本文提出一种新的光散射探针染料———铀试剂Ⅰ (ArsenazoⅠ ) ,在pH 3 2 9的条件下 ,ArsenazoⅠ本身只有极弱的光散射 ,它与蛋白质的结合物有强烈的共振光散射作用。在λ =4 0 0nm处 ,光散射有最大强度 ,光散射强度与蛋白质的浓度成正比。据此建立了一种测定蛋白质的新方法。该方法简便、快速、灵敏度高 ,对HSA的检测限达到 6 0ng·mL-1 ,线性范围达到 0~ 18μg·mL-1 ,用于人体血清样品的分析并同考马斯亮蓝法比较 ,取得了令人满意的结果。本文也研究了牛血清白蛋白 (BSA)、γ球蛋白、鸡蛋白蛋白、溶菌酶、胃蛋白酶与染料ArsonazoⅠ之间的作用 ,探讨了共振光散射的机理

【Abstract】 A new RLS (Resonance light scattering) probe is presented in this paper In the Britton Robinson buffer at pH 3 29, ArsenazoⅠ combines with proteins by intermolecular forces, resulted in an enhanced Rayleigh light scattering The RLS intensity reaches maximum at 400 nm and is proportional to the concentration of protein A novel method for the determination of micro amount of protein is developed The assay is simple, rapid and sensitive with a detection limit at 60 ng·mL -1 and a linear range up to 18 μg·mL -1 This method is applied to the determination of human serum protein, and the results, compared to Bradford method, is satisfactory The interaction of ArsenazoⅠ with BSA, γ G, oval albumin, lysozyme, pepsin are investigated and the mechanism of RLS is also discussedthedeterminationofmicro amountofproteinisdev

【关键词】 共振光散射; 蛋白质; 铀试剂Ⅰ;
【Key words】 Resonance light scattering; Protein; Arsenazo Ⅰ;
【基金】 国家自然科学基金资助 ( 2 97750 0 3 )
  • 【文献出处】 光谱学与光谱分析 ,Spectroscopy and Spectral Analysis , 编辑部邮箱 ,2002年04期
  • 【分类号】O657.3
  • 【被引频次】46
  • 【下载频次】118
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