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PET15b-BCG HSP65-GP2重组质粒的构建与鉴定

Construction of recombinant plasmid expressed PET15b-BCG HSP65-GP2 fusion protein gene

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【作者】 王丽娟吴士彬于永利王丽颖

【Author】 WANG Li juan,WU Shi bin,YU Yong li,WANG Li Ying (Department of Microbiology & Parasitology,Bengbu Medical College,Anhui 233003 ,China)

【机构】 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省蚌埠市第三人民医院泌尿外科吉林大学基础医学院免疫学教研室吉林大学基础医学院分子生物学教研室 安徽蚌埠233003233000吉林长春130021吉林长春130021

【摘要】 目的 :构建表达卡介苗热休克蛋白 6 5 (BCGHSP6 5 )与人HER 2 /neu细胞毒T淋巴细胞 (CTL)表位 (GP2 )构成的融合蛋白 (BCGHSP6 5 GP2 )的重组质粒。方法 :将用PCR方法扩增并回收的BCGHSP6 5 GP2 基因片段与原核表达质粒PET15b重组 ,经过酶谱分析筛选出正向重组质粒 ,DNA序列分析正向重组质粒。结果 :筛选出 3个正向重组质粒。结论 :重组表达质粒PET15b BCGHSP6 5 GP2 的构建是成功的 ,为进一步表达奠定基础

【Abstract】 Objective:To construct a recombinant plasmid that expressed BCG HSP65 fused with human HER 2/neu cytotoxic T lymphocyte(CTL) epitope.Methods:BCG HSP65 GP 2 gene fragment was amplified by PCR approach and then cloned into prokaryote expressed plasmid PET 15b .Forward recombinant plasmids were screened by endo nucleases digestion analysis.Results:Three forward recombinant plasmids were obtained.Conclusions:It has been suggested that we have constructed a recombinant expressed PET 15b vector which expressed BCG HSP65 fused with human HER 2/neu CTL epitope.It lay foundation on further expression and biofunction assay.

  • 【文献出处】 蚌埠医学院学报 ,Journal of Bengbu Medicinae College , 编辑部邮箱 ,2002年05期
  • 【分类号】R73-362
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】49
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