肝癌相关抗原基因的筛选和阳性克隆的序列分析

【摘要】 克隆肿瘤相关抗原基因，从分子水平上研究其结构与功能，对于深入了解肿瘤的发生机制很有帮助。本研究利用自制的肝癌特异性单克隆抗体（ｍＡｂ） Ｆ１１，筛选肝癌细胞ｃＤＮＡ表达文库，获得１个阳性克隆，并对其进行了序列测定及同源性比较分析。１材料和方法１． １材料抗肝癌ｍＡｂ Ｆ１１［１］为本室制备、纯化。肝癌细胞ｃＤＮＡ表达文库（载体为 λｇｔ１１）由本室构建。测序用试剂ＡＢＩ ＰＲＩＳＭ ＢｉｇＤｙｅＴＭ Ｔｅｒｍｉｎａｔｏｒ为ＰＥ公司产品。测序仪为ＡＢＩ ＰＲＩＳＭＴＭ ３３７ＸＬ型。１．２方法克隆的筛选按文献［２］的方法进行。测序按商家说明书进行。序列分析采用 Ｎｏｎ－ｒｅｄｕｎｄａｎｔ Ｃｅｎ更多还原