SKW6细胞在转导6A8α-甘露糖苷酶反义cDNA后对抗Fas抗体诱导的凋亡

【摘要】 鉴于蛋白质糖基化的重要生物学意义，以腺相关病毒为载体，把编码 ６Ａ８ α－ 甘露糖苷酶的ｃＤＮＡ ３’端１３５８ｂｐ的反向片段转导入ＥＢ病毒转化的Ｂ细胞株ＳＫＷ６， 探讨６Ａ８ α-甘露糖苷酶表达抑制对抗Ｆａｓ抗体诱导凋亡的影响．反义６Ａ８转导成功及 表达用 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交及ＲＴ－ＰＣＲ检测， ６Ａ８ α－甘露糖苷酶表达用 Ｃｏｎ Ａ结合试验检测． Ｇｉｅｍｓａ染色， Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ染色及梯形 ＤＮＡ电泳显示， Ｆａｓ抗体能诱导 ＳＫＷ６细胞凋亡，但 ６Ａ８ α－甘露糖苷酶表达抑制的细胞对Ｆａｓ抗体诱导的凋亡发生抵抗，而转导正义 ６Ａ８ 或空载载体则无影响． ６Ａ８ α－甘露糖苷酶表达状况对 ＳＫＷ６细胞表面 Ｆａｓ分子表达没有影响．更多还原