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TTV蛋白抗原在大肠杆菌中的表达

Expression of TTV recombinant protein antigen in E.coli

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【Author】 LIU Limin 1) ,XING Peiqing 1) ,LI Jianbin 1) ,HU Jun 2) ,CHEN Zongde 2) ,ZHOU Yusen 3)△ ,WANG Haitao 3) 1)The Red Cross Blood Center of Henan Province,Zhengzhou 450053 2)Department of Microorganism and Immunology,Henan Medi

【机构】河南省红十字血液中心；河南医科大学微生物与免疫学教研室；中国军事医学科学院微生物与流行病研究所；中国军事医学科学院微生物与流行病研究所郑州450053；郑州450053；郑州45005；

【摘要】目的 :用原核系统表达TTV的重组蛋白抗原 ,建立诊断TTV感染的特异性方法。方法 :采用PCR方法扩增TTVORF2 基因 ,将之插入到测序质粒载体中进行测序 ,验证序列正确后再嵌入到原核表达载体pQE30 ,并转化大肠杆菌M15菌株 ,进行诱导表达。用SDS PAGE分析表达产物。表达产物经Ni NTA柱层析纯化后 ,得到纯度为90 %的ORF蛋白抗原。用TTV感染者的阳性血清对该蛋白进行了Western BlotBlotting分析。结果 :经IPTG诱导后 ,筛选出 2株高表达株。结论 :该蛋白具有良好的抗原活性更多还原

【Abstract】 Aim:To explore the expression of TTV recombinant protein antigen in E.coli.Methods:Using PCR to sequence the TTV gene and clone to T vector.The recombinant plasmid was transformed into E.coli strain M15 and induced with IPTG.We purified the specific expressed protein through Ni NTA column,then the purification was analyzed by Western Blotting.Results:The TTV recombinant protein antigen was expressed in E.coli.Conclusion: The recombinan protein antigen can used for diagnosis of TTV infection.更多还原

【关键词】 TTV；重组蛋白抗原；原核表达；大肠肝菌；
【Key words】 TTV； recombinant protein antigen； expression of protein in E.coli；

【基金】国家自然科学基金资助项目　 3990 0 133

【文献出处】河南医科大学学报 ,Journa of Henan Medical University , 编辑部邮箱 ,2001年06期

【分类号】R373.21
【被引频次】3
【下载频次】47

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