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反向嵌套PCR法高效扩增辽宁碱蓬甜菜碱醛脱氢酶cDNA5′末端序列

Rapid Amplification of 5′cDNA End of S.Liaotungensis Betaine Aldehyde Dehydrogenase by Inverse Nested PCR

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【作者】 李秋莉高晓蓉范琦袁晓东刘大伟安利佳

【Author】 Li Qiuli , Gao Xiaorong , Fan Qi , Yuan Xiaodong , Liu Dawei , An Lijia  ( Bioengineering Department of Dalin University of Technology, Dalin 116012) ( Biology Department of Liaoning Normal University, Dalin

【机构】 大连理工大学生物工程系宝生物工程大连有限公司大连理工大学生物工程系 大连116012辽宁师范大学生物系大连116029大连116012大连116600大连116012

【摘要】 采用反向嵌套PCR法 ,根据已获得的辽宁碱蓬甜菜碱醛脱氢酶cDNA的部分序列 ,设计一条 5′末端磷酸化的特异性反转录引物和两对特异性反向嵌套PCR引物 ,成功地克隆了辽宁碱蓬甜菜碱醛脱氢酶cDNA 5′末端。与锚定PCR法相比 ,反向嵌套PCR法具有特异性强、扩增效率高等优点 ,是一种非常有效的扩增cDNA 5′末端序列的方法。

【Abstract】 Inverse nested PCR can rapidly amplify 5′cDNA ends by using a specific RT primer whose 5′end is phosphated and two pairs specific Inverse nested PCR primers. In this reseach,the 5′cDNA ends of S.Liaotungensis betaine aldehyde dehydrogenase is cloned using this method.Contract with the Anchored PCR,Inverse nested PCR has better specificity and higher amplificaton effects.It is a very effective method of amplifying 5′cDNA ends.

【基金】 辽宁省教育厅资助项目 (项目编号为 2 0 0 42 0 98)
  • 【文献出处】 高技术通讯 ,High Technology Letters , 编辑部邮箱 ,2001年11期
  • 【分类号】Q503
  • 【被引频次】26
  • 【下载频次】198
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