梅毒螺旋体37000内鞭毛蛋白基因的扩增、克隆及鉴定

【摘要】 多数细菌的鞭毛是由单一多肽组成的多聚体，但与此相反，梅毒螺旋体 (TP)的内鞭毛不在菌体表面，是由多肽排列于外鞘和中央核内， TP鞭毛的特殊解剖位置，使其不应是完整菌体最先识别的抗原，而事实则相反，鞭毛蛋白是人类感染 TP后最先产生 IgM和 IgG抗体的抗原，可能是因其可借助于某种方式穿过外膜，暴露于菌体表面 [1]。尽管该基因序列已清楚，但尚未在大肠杆菌中成功表达 [2]。 37 000鞭毛蛋白抗原有很强的免疫原性，家兔感染 1周内即可产生特异性抗体。因此，检测 37 000鞭毛蛋白抗体临床上可能颇有实用价值，但如何获得大量的抗原，首先必需成功克隆，然后进行高效表达。故我们用 PCR扩增更多还原