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斜纹夜蛾核多角体病毒几丁质酶基因的克隆及序列分析

Cloning and Sequence Analysis of the Chitinase Gene of Spodoptera litura Nuclear Polyhedrosis Virus

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【作者】 胡国栋庞义杨凯李充璧苏德明

【Author】 HU Guo-Dong, PANG Yi *, YANG Kai, LI Chong-Bi, SU De-Ming 1 ( State Key Laboratory for Biocontrol and Institute of Entomology, Zhongshan Uni versity, Guangzhou 510275, China; 1Virology Research Unit, Fudan University, Shanghai 200433, Chi n

【机构】 中山大学生物防治国家重点实验室/昆虫学研究所!广州510275复旦大学生命科学学院病毒学研究室!上

【摘要】 以苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒 (Autographacalifornicamultinucleocapsidnuclearpolyhedrosisvirus,AcMN PV)基因组含几丁质酶基因 (chiA)的 pstIM片段为探针 ,通过Southern杂交将斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodopteralituranuclearpolyhedrosisvirus,SpltNPV)的chiA基因定位在其基因组DNA两个相邻的XbaI片段(5 .1kb及 2 .1kb片段 )上 ,克隆了包含该基因完整序列的片段 ,并测定了它的核苷酸全序列。该基因读码框为16 95个核苷酸 ,编码 5 6 4个氨基酸的蛋白质 ,分子量为 6 2 .9kD ,在起始密码子ATG上游 - 10处有一个杆状病毒晚期启动子模体TAAG ,在终止密码子TAA下游有一个真核生物基因mRNA转录poly(A)加尾信号序列AATAAA。在SpltNPVchiA基因氨基酸序列的N端预期有由 2 3个氨基酸构成的真核生物信号肽。SpltNPVchiA基因氨基酸序列与AcMNPVchiA基因序列的同源性为 5 7%。

【Abstract】 Using AcMNPV chiA-containing fragment as a probe, the chitinase gene of Spodoptera litura nuclear polyhedrosis virus (SpltNPV) was localized in two contiguous fragments, XbaI 5.1 kb and 2.1 kb, and the intact SpltNPV chi A gene w as obtained by cloning and sequencing those two fragments. The complete open rea ding frame of the gene was 1 695 nucleotide long, encoding a putative protein of 564 amino acids with molecular weight of 62.9 kD. Sequence analysis further rev ealed that the 5′ noncoding region had a baculovirus late promoter motif TG. A polyadenylation signal, TA, was located dowmnstream of the translation sto p codon. A putative signal peptide was present at the N-terminus of the protein . This gene shares 57% homology with AcMNPV chitinase gene.

【基金】 国家自然科学基金!(No .3 973 0 0 3 0和No .3 9680 0 2 9)资助项目&&
  • 【文献出处】 生物化学与生物物理学报 ,ACTA BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA SINICA , 编辑部邮箱 ,2000年05期
  • 【分类号】Q785
  • 【被引频次】4
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