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圈卷产色链霉菌分化基因sawB的结构与功能
【摘要】 以 San3AI部分酶切野生型圈卷产色链霉菌7100(Streptomycesansochromosenes 7100)染色体 DNA,回收 3~ 6 kb的 DNA片段,插入到链霉菌表达载体 pIJ702的 BglⅡ 位点,转化圈卷产色链霉菌白色突变株W19,得到了近3 000个转化子,从中筛选到了 两个具有硫链丝菌素抗性和野生型灰色表型的转化子.进行了质粒提取和酶切分析, 两个重组质粒分别命名为 pNL-1和 pNL-2(分别含有约 5.2和 5.8 kb的外源片段).通过 亚克隆及突变株互补实验,将互补w19的基因定位在了1.25比的Pst1一Apa1片段上. DNA序列分析结果表明,该DNA片段中含有一个完整的可读框(ORF1),编码一个由 295个氨基酸组成的蛋白质,该基因命名为sawB.利用Blast程序在蛋白数据库中比较 发现,SawB与天蓝色链霉菌的一个转录调控蛋白WhiH具有81%的一致性.利用基因 破坏策略研究了sawB的功能,结果发现,野生型菌株的sawB基因破坏后,丧失了孢子 形成能力,由灰色表型转变为白色表型.显微镜下观察sawB突变株的气生菌丝长而直, 顶部略有波浪形卷曲,螺旋程度有所下降.由此可知,sa
【基金】 国家自然科学重点基金!(批准号:39830010);微生物资源前期开发国家重点实验室资助
- 【文献出处】 中国科学C辑:生命科学 , 编辑部邮箱 ,2000年03期
- 【分类号】Q933
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