微孢子虫RNA的制备方法

【摘要】 微孢子虫外被厚壁的主要成分为几丁质与蛋白质 ,故对外界不良环境具有较强的抵抗性。因此 ,获取微孢子虫孢原质的主要方法是利用孢子在碱性环境[1] 、酸性环境[2 ] 、从酸性环境转至碱性环境[3] 或从强碱性环境转至弱碱性环境或中性环境[4] 等条件下 ,极丝容易弹出而释放出孢原质的特点。也可采用玻璃珠破碎法[5] 来获取微孢子虫的孢原质。获取的孢原质目前主要用来提取微孢子虫的基因组ＤＮＡ ,而关于微孢子虫ＲＮＡ的制备方法国内外均未见报道。我们在异硫氰酸胍法的基础上加以改进 ,高效地提取到无降解的微孢子虫ＲＮＡ。1　材料与方法1 1　试剂和溶液焦碳酸二乙酯 (ＤＥＰＣ)为Ｓａｎｇｏｎ公司产品更多还原