流式细胞术双标记法检测实体肿瘤DNA含量、细胞周期及Ki67表达

【摘要】 本研究主要利用流式细胞术DNA／Ki67双标记法同时检测恶性实体肿瘤细胞的DNA含量、细胞周期和Ki67的表达和周期分布，并探索其相互之间和与病理组织学分级的关系。1材料与方法1．1材料1999年2～8月，经我院病理确诊的新鲜恶性实体瘤标本87例。按病理组织学分级，高分化肿瘤9例，中度分化肿瘤24例，低分化肿瘤54例。标本置于RPMI1640培养液内，4℃保存，24小时内制备成单细胞悬液。1．2方法1．2．1单细胞悬液制备：上述标本用PBS洗净后剪成1mm3碎块，置于100目不锈钢网上轻辗，边以PBS缓满，收集摘下的液体后用200目尼龙膜过滤后，1500r／min离心5min，PBS洗两次，去更多还原