缺血预处理对大鼠海马CA₁区神经元bcl-2表达的影响

【摘要】 目的　探讨前脑缺血再灌注引起的海马ＣＡ_１区神经元死亡是否包含凋亡机制的参与以及缺血预处理（ＩＰＣ）是否通过影响凋亡抑抑制基因ｂｃｌ－２的表达起到脑缺血损伤保护作用。方法（１）动物模型建立及分组；选用健康成年雄性Ｗｉｓ－ｔａｒ大鼠，参照Ｐｕｌｓｉｎｅｌｌｉ的四血管阻断法建立前脑缺血模型。动物分为３组；单纯缺血再灌注组（ＩＲ组），给子假手术３ｄ后行８ｍｉｎ致死性缺血；缺血预处理组（ＩＰＣ组），先给予３ｍｉｎ短暂缺血，３ｄ后再给予８ｍｉｎ缺血；对照组，只给予假手术，不给于缺血刺激。（２）结合ＰＩ染色的流氏细胞术检测：于缺血再灌注２４ｈ。迅速取两背侧新鲜海邓组织，采用流氏细胞仪（ＦＣＭ）进行海马ＣＡ_１区神经元细胞凋亡的检测，低于Ｇ_１期ＤＮＡ含量的细胞为凋亡细胞。（３）免疫组化检测：于缺皿再灌注２ｈ，取脑制备冰冻切片，采用ＳＡＢＣ法检测各组海马ＣＡ_１区神经元ｂｃｌ－２及 ｂｃｌ－ｘｌ训蛋白的表达。结果流氏细胞术检测显示，ＩＲ组及 ＩＰＣ组缺血再灌注 ２４ｈ时海马ＣＡ_１区神经元的凋亡百分率分别为１３．１１±３．００％和２．４０±０．９８％，与对照组（凋亡百分率为Ｉ．３４±０．６２％）相比，均有显著性差异(Ｐ＜０．００?更多还原