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HER-2基因打靶对HeLa细胞生长的抑制

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【摘要】 构建具有正、负筛选特性的HER-2基因打靶载体,promoter pPNT 1305。用电穿孔法把线性promoter pPNT 1305导入HeLa细胞,经G418正筛选及丙氧鸟苷负筛选,选出敲除了HER-2单等位基因的打靶命中细胞(HER-2-1细胞)。Northern杂交表明,HER-2-1细胞的HER-2 mRNA水平低于HeLa细胞;Western blot结果显示其HER-2蛋白水平下降,亦低于HeLa细胞。流式细胞计分析表明,HER-2单等位基因敲除后,细胞周期时相左移,G1期比例上升,G2+M期比例下降。可见敲除HER-2基因对HeLa细胞生长具有抑制作用。

【关键词】 基因打靶原癌基因细胞周期
【基金】 国家自然科学基金(批准号:39670806)
  • 【分类号】R73-3
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