胞嘧啶脱氨酶基因重组逆转录病毒载体构建及对PA317细胞的转移表达

【摘要】 逆转录病毒载体是向真核细胞中进行基因转移的高效载体之一，是比较成熟和应用范围最广的基因转移和基因治疗载体。胞嘧啶脱氨酶（ｃｙｔｏｓｉｎｅｄｅａｍｉｎｅｓｅ，ＣＤ）基因是一重要的自杀性基因，我们研究的目的是克隆构建含有ＣＤ基因的重组逆转录病毒载体，并将该基因导入ＰＡ３１７包装细胞，建立完整的和安全高效的逆转录病毒表达载体系统，为开展ＣＤ基因与前体药物５氟胞嘧啶（５ｆｌｕｏｒｏｃｙｔｏｓｉｎｅ，５Ｆｃ）联合用于肿瘤的实验治疗研究奠定基础。材料与方法　１－主要试剂：限制性内切酶、Ｔ４ＤＮＡ连接酶购自华美生物工程公司，Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎｒｅａｇｅｎｔ、Ｇ４１８购自Ｇｉｂｃｏ公司，ｐＬＸＳＮ为逆更多还原