随机扩增DNA多态性分析用于肺炎克雷伯菌分型

【摘要】 <正>随着抗菌素及各种免疫抑制剂的广泛应用,医院内感染日益增多。确认医院感染病原的方法有血清分型、质粒分型及限制性内切酶分型,其共同缺点是分型率低,分辨力差。我们用随机扩增DNA多态性分析(Randomly amplified polymorphic DNA analysis RAPD)对临床48株肺炎克雷伯菌肺炎亚种(Klebsiel-la Pneumonia subsp pneumonia kp·sp)进行分型。 1 材料与方法 菌株 1997年9月～1997年11月,本院心内科病房(19株,9人),肿瘤病房(21株,11人)及其它病房菌株(8株,7人)共48株,所有菌株经API鉴定为kp·sp。 细菌DNA制备 kp·sp纯菌落2～3个,生理盐水离心洗2次,加裂解液40μl于细菌沉淀物中,100℃10min,10000r/min离心10min,上清为PCR模板。更多还原