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抗真菌肽LP-1的分离纯化及特性分析

PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF ANTIFUNGAL PEPTIDELP 1

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【作者】 刘颖徐庆陈章良

【Author】 Liu Ying Xu Qing Chen Zhangliang ( National Laboratory of Protein Engineering and Plant Genetic Engineering , Peking University, Beijing 100871)

【机构】 北京大学生命科学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室!北京100871

【摘要】 拮抗菌枯草芽孢杆菌( Bacillus subtilis)TG26 分泌产生的小肽经两次盐酸沉淀、丙酮分级沉淀和Hipore 反相柱两次纯化,分离得到一种新的抗真菌的小肽,命名为LP1 。经MALDITOF质谱鉴定,分子量为1057-3 ,等电聚焦测得其pI为4-75 。LP1 对温度有较高的稳定性,100 ℃保温30min ,仍能保持75 % 的活性。抑菌谱表明,该抗菌肽对瓜果腐霉( Pythiu m aphanidermatu m) 、玉蜀黍赤霉病菌( Gibberella zeae) 、长柄链格孢( Alternarialongipe) 和番茄蔫萎座镰孢霉( Fusariu m oxysporum f.lycopersici) 等植物病原真菌有很强的抑制作用。LP1 可造成绿色木霉( Trichoderma viride) 菌丝生长形态异常:菌丝端部膨大,菌丝扭曲,分支加剧,菌丝内细胞质分布不均匀,发生凝聚。茚三酮反应以及测序结果均证实其为环肽。

【Abstract】 An antifungalpeptide LP 1 from Bacillussubtilis TG26 strain was purified by acid pre cipitation,acetone precipitation and Hi porereversed phase column chromatography.The molecular weightof LP 1is1057.3 Dasdetermined by MALDI TOFmassspectrometry,andits pIis 4 .75 by PAG IEF.It wasalsofound to bethermostable.Its antifungalspectrum showed that LP 1 has stronginhibitory activity against many plant pathogenicfungi,such as Pythium aphanidermatum ,Gibberella zeae,Alternaria longipe,Fusarium oxysporum f.lycopersici,etc.. The abnormal hy phalgrowth of Trichoderma viridecaused by LP 1 such asswollentips,twisted,shortgrowth and cytoplasm condensation wasalsoobserved.Both ninhydrinreaction and peptidesequencingsuggested that LP 1is acyclic peptide.

【基金】 北京大学预研基金
  • 【文献出处】 微生物学报 ,ACTA MICROBIOLOGICA SINICA , 编辑部邮箱 ,1999年05期
  • 【分类号】Q516
  • 【被引频次】293
  • 【下载频次】1017
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