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液泡膜H~+-ATPase质子泵活性的荧光测定

Fluorescence Measurement of Proton Pumping of Tonoplast H + ATPase.

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【作者】 王欢祝雄伟王延枝

【Author】 WANG Huan, ZHU Xiong Wei, WANG Yan Zhi(School of Life Science, Wuhan University, Wuhan 430072, China).

【机构】 武汉大学生命科学学院

【摘要】 使用荧光猝灭法测定植物液泡膜H+ATPase质子转运活性.比较了两种常用荧光染料吖啶橙和喹亚因在不同浓度的测定灵敏度.探讨了不同蛋白量和缓冲系统对测定结果的影响.得到了用5μmol/L吖啶橙,200~250μg蛋白质含量,HepesTris(pH70)为缓冲介质,ATPNa为底物的最适体系

【Abstract】 Fluorescence quenching method was to measure the proton pumping activity of tonoplast H + ATPase from higher plants. The sensitivity of two common fluorescent dyes was compared. Acridine orange is better than quinacrine with the initial slope and maximum quenching. The optimim for the fluorescence measurement of acridine orange dye were: 5 μmol/L acridine orange, 200~250 μg protein, Hepes Tris of Hepes BTP(pH 7 0). Initiating with ATP or Mg 2+ was both valid.

【基金】 国家自然科学基金
  • 【文献出处】 生物化学与生物物理进展 ,PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS , 编辑部邮箱 ,1999年02期
  • 【分类号】Q730.35
  • 【被引频次】7
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