蒲公英黄酮缓解肉鸡免疫应激的作用效果研究

【作者】 田越； 王学常； 耿晓峰； 艾嘉伟； 刘雪露； 陈辉； 陈一凡；

【机构】 河北农业大学动物科技学院；

【摘要】 在现代集约养殖条件下,以高密度饲养和暴露于病原微生物为特征的肉鸡可诱导免疫应激,导致采食量减少、生长受损和疾病易感性增加。蒲公英黄酮(dandelion flavonoids,DF)具有免疫调节作用,但其在畜牧业尤其是肉鸡中的应用研究相对较少。因此,本研究旨在通过腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)建立免疫应激模型。通过测定肉鸡免疫器官指数、炎症因子和免疫球蛋白含量、盲肠菌群和血清代谢物丰度,确定DF是否以及如何缓解肉鸡免疫应激。选取健康且体重相近的1日龄白羽肉仔鸡400只,随机分为5组,每组8个重复,每个重复10只鸡。处理包括:CON、LPS、DF200、DF300和DF400。CON组和LPS组饲喂基础饲粮,其余3组分别在基础饲粮中添加200mg/kg、300mg/kg和400mg/kg DF。每个重复中随机挑选1只鸡,LPS组和DF组分别于第38、40、42天腹腔注射生理盐水配制的1 mg/kg体重的LPS溶液,对照组注射等量生理盐水。结果表明,1)与对照组相比,LPS应激显著提高了肉鸡的肝脏指数和脾脏指数(P<0.05);与LPS组相比,饲料中添加300 mg/kg、400 mg/kg DF均显著降低LPS应激肉鸡的肝脏指数(P<0.05);饲粮中添加400 mg/kg DF显著降低LPS应激肉鸡脾脏指数(P<0.05)。2)与对照组相比,LPS组血清TNF-α含量显著升高(P<0.05);与LPS组相比,饲喂DF均显著降低LPS应激肉鸡TNF-α、IL-1β含量(P<0.05);同时,饲喂300 mg/kg DF显著提高血清IL-10含量(P<0.05)。3)与对照组相比,LPS应激肉鸡血清IgM含量显著下降(P<0.05);与LPS组相比,饲喂200和300 mg/kg DF均显著提高LPS应激肉鸡IgM含量(P<0.05);饲喂400 mg/kg DF能够显著提高LPS应激肉鸡IgA、IgM和IgG含量(P<0.05)。4)在门水平上,与对照组相比,LPS应激显著提高了肉鸡厚壁菌门(Firmicutes)与拟杆菌门(Bacteroidota)比例(P<0.01);饲喂DF对LPS应激肉鸡Firmicutes、Bacteroidota相对丰度及两者比例均无显著影响。与LPS组相比,饲喂300和400mg/kg DF均显著降低LPS应激肉鸡盲肠Firmicutes相对丰度(P<0.01),饲喂DF均显著提高LPS应激肉鸡盲肠Bacteroidota相对丰度(P<0.01)且显著降低Firmicutes和Bacteroidota比例(P<0.01)。在属水平上,与LPS组相比,饲喂DF均显著提高LPS应激肉鸡盲肠拟杆菌属(Bacteroides)相对丰度(P<0.01)。5)血清代谢组学鉴定出19个差异代谢物,其中7α-羟基-3-氧代-4-胆甾烯酸(7alpha-Hydroxy-3-oxo-4-cholestenoate)、11-脱氧皮质醇(11-deoxycortisol)、牛磺胆酸(taurocholic acid)和三乙醇胺(triethanolamine)被确定为关键生物标志物。与对照组相比,LPS处理显著提高了肉鸡7alpha-Hydroxy-3-oxo-4-cholestenoate、 11-deoxycortisol、taurocholic acid的丰度(P<0.01)。与LPS组相比,饲喂DF均显著降低11-deoxycortisol、taurocholic acid、triethanolamine丰度(P<0.01),饲喂200和300 mg/kg DF均显著降低7alpha-Hydroxy-3-oxo-4-cholestenoate丰度。6) Spearman相关性分析揭示:11-deoxycortisol、 taurocholic acid和triethanolamine与IL-1β(P<0.05)和TNF-α呈显著正相关(P<0.01)。11-deoxycortisol、taurocholic acid与IL-10呈显著负相关(P<0.01)。taurocholic acid(P<0.05)和triethanolamine(P<0.01)与IgM呈显著负相关。Bacteroides与IgG(P<0.01)和IL-10(P<0.05)显著正相关,与TNF-α显著负相关(P<0.01)。Bacteroides与7α-Hydroxy-3-oxo-4-cholestenoate呈显著负相关(P<0.05),而7α-Hydroxy-3-oxo-4-cholestenoate与TNF-α呈显著正相关(P<0.01)。综上,DF可能通过调控盲肠菌群-血清代谢物-免疫应答,重塑机体免疫稳态。更多还原