槟榔碱促口腔鳞状细胞癌机制初探

【作者】 刘艺； 王丹丹； 陈静； 宫丽崑；

【机构】 原创新药研究全国重点实验室药物安全评价研究中心中国科学院上海药物研究所； 南京中医药大学新中药学院；

【摘要】 目的:槟榔被世界卫生组织国际癌症研究机构列为1类致癌物,与口腔鳞状细胞癌的发生密切相关。槟榔碱(Arecoline)是槟榔中主要的生物碱,有报道槟榔碱可能通过诱导DNA损伤、氧化应激或表观遗传修饰等途径促进癌变。然关于其是否具有直接致突变作用一直存在争议。本研究旨在评估槟榔碱的遗传毒性并初步探究其对口腔鳞状细胞癌发生的机制。方法:首先采用AMES试验确定槟榔生物碱在代谢活化条件下或非代谢活化条件下对鼠伤寒沙门氏菌TA97a、TA98、TA100、TA1535和埃希氏大肠杆菌WP2的致突变作用;随后采用miniAMES试验分别确认4种槟榔生物碱(氢溴酸槟榔碱(采用槟榔碱氢溴酸盐形式,避免槟榔碱稳定性及溶解度差)、槟榔次碱、去甲槟榔碱和去甲槟榔次碱对TA98、TA100的致突变作用;最后采用CCK8试验确定氢溴酸槟榔碱对人永生化角质形成细胞(HACAT)的促增殖及细胞毒性作用。结果:AMES试验结果显示槟榔生物碱在代谢活化条件下或非代谢活化条件下均无致突变作用;随后采用mini-AMES试验进一步分别确认了氢溴酸槟榔碱、槟榔次碱、去甲槟榔碱和去甲槟榔次碱在代谢活化条件下或非代谢活化条件下也均无致突变作用。之后为了探究氢溴酸槟榔碱是否是直接促进口腔角质形成细胞(HACAT)过度增殖导致癌变,进行了细胞活力检测(CCK8法),结果表明,氢溴酸槟榔碱并不促进HACAT细胞增殖,反而具有一定的细胞毒性作用,其CC50为0.66 mM。以上结果提示氢溴酸槟榔碱无体外致突变性及促增殖作用。结论:本研究通过AMES、mini-Ames和CCK8等试验确定氢溴酸槟榔碱不是通过基因突变驱动癌变及直接促进角质细胞过度增殖而诱发癌变。更多还原