PPARs靶向Fad和Elovl转录调控缢蛏HUFA合成

【作者】 谢海璇； 徐继林； 冉照收；

【机构】 宁波大学；

【摘要】 过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)是脊椎动物高不饱和脂肪酸(HUFA)合成的重要调控因子,但其在海洋软体动物HUFA合成调控中的作用尚不清楚。缢蛏是迄今唯一证实的具备完整HUFA合成通路的海洋软体动物,为阐释该问题提供了良好契机。本文在课题组前期鉴定的缢蛏PPARs(Sc PPARa,MW048582和Sc PPARb,MW048583)基础上,首先构建了通过摄食表达dsRNA的HT115菌敲降缢蛏PPARs的方法体系;其次,研究了敲降缢蛏PPARs对脂肪酸去饱和酶(Fad)和长链脂肪酸延长酶(Elovl)表达、及脂肪酸组成的影响;最后,借助双荧光素酶报告(LUC)试验,系统探究了缢蛏PPARs对Fad和Elovl启动子的转录激活作用,并明确了核心PPRE位点。结果表明,该方法体系可以有效敲降缢蛏PPARs表达至～50%;敲降Sc PPARa导致Δ5Fadb、Δ6Fad和Elovl4a显著下调,以及Elovl2/5显著上调,而敲降Sc PPARb引起Elovl4a显著下调,以及Δ5Fad5b和Elovlc下调(虽不显著);同时,与对照组(敲降EGFP)相比,敲降Sc PPARa导致EPA和DHA百分含量显著降低,而敲降Sc PPARb则相反;LUC试验表明,Elovl2/5和Elovl4a/b启动子转录活性受到Sc PPARa和Sc PPARb共调控,而Δ6Fad和Elovlc启动子活性受到Sc PPARb单独调控。综上,PPARs可通过靶向Fad和Elovl转录调控缢蛏HUFA合成;缢蛏PPARs敲降与LUC试验所指向的潜在Fad和Elovl靶基因的不一致可能与脂代谢调控的复杂性密切相关,即其它HUFA合成调控因子可能参与了缢蛏PPARs敲降引起的脂代谢紊乱。本文首次报道了PPARs对海洋软体动物HUFA合成的调控作用,为优化其HUFA合成途径提供了数据支撑。更多还原