Caspase-3/gasdermin E介导的巨噬细胞焦亡参与牙周炎发病机制的研究

【作者】 高湘茹； 杨彩秀； 李姝函； 鲁朝玉； 吉秋霞；

【机构】 青岛大学附属医院牙周病科； 青岛大学口腔医学院；

【摘要】 目的:牙周炎是一种由细菌感染引起的慢性炎症性疾病,最近有报道细胞焦亡(pyroptosis)与其发病密切相关。巨噬细胞是维持牙周微环境稳态的重要细胞,对牙周健康至关重要。本研究旨在探讨巨噬细胞焦亡在牙周炎发病机制中的作用。方法:采用免疫荧光双染法检测正常牙龈组织和牙周炎症牙龈组织中焦亡标志物gasdermin E (GSDME)和巨噬细胞表面标志物CD68的表达及分布。体外诱导细胞焦亡模型,在核因子κb (NF-κB)激动剂(PMA)或抑制剂(PDTC)处理后,用牙龈卟啉单胞菌-脂多糖(P. gingivalis-LPS)刺激RAW264.7细胞。通过qRT-PCR、western blot和ELISA技术检测NF-κB、caspase-3、GSDME和IL-1β的mRNA和蛋白表达水平。结果:免疫荧光双染结果显示健康牙龈组织相比,GSDME和CD68在炎症牙龈组织中显著升高,并且在同一区域共定位。P. gingivalis-LPS刺激RAW264.7细胞后,NF-κB、caspase-3、GSDME和IL-1β的mRNA和蛋白表达水平均显著上调,而用NF-κB激动剂或抑制剂预处理RAW264.7细胞后,再用P. gingivalis-LPS可增强或抑制上述作用。结论:GSDME介导的巨噬细胞焦亡与牙周炎发病有关。基于体外实验,P.gingivalis-LPS通过caspase-3/GSDME途径引起RAW264.7细胞焦亡。此外,NF-κB位于该条通路上游,可参与调控该通路。更多还原