牙龈卟啉单胞菌通过AhR/IDO信号促进ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化的作用研究

【作者】 王新越； 郝婷； 杨洁； 吴文蕾；

【机构】 南京大学医学院附属口腔医院南京市口腔医院；

【摘要】 目的:探究芳香烃受体和吲哚胺2,3双加氧酶（AhR/IDO）信号通路在牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis, Pg）促进ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）中的作用,揭示牙周炎促进AS的可能机制。方法:高脂饮食下对8周龄ApoE^-/-小鼠给予Pg牙周涂菌,8周后处死小鼠,通过micro-CT、HE染色、油红O染色、Masson染色等方法检测小鼠牙槽骨吸收及牙周炎症情况并检测斑块形成情况,以示牙周炎伴动脉粥样硬化模型建模成功;通过qRT-PCR、IHC、HPLC等技术检测模型主动脉斑块中的AhR、IDO的基因和蛋白水平并计算血清中IDO的活性。对牙周炎伴动脉粥样硬化模型实施AHR干预剂,通过qRT-PCR、IHC、HPLC等技术检测干预后的模型主动脉斑块中的AhR、IDO的水平并计算血清中IDO的活性;通过流式细胞术、油红O染色、Masson染色等技术检测干预后的模型体内Th17/Treg水平和斑块形成的面积及比例。结果:口腔感染Pg的ApoE^-/-小鼠牙槽骨吸收增加,牙周炎症细胞浸润增加,动脉粥样硬化斑块面积比未感染小鼠增大,即牙周炎伴动脉粥样硬化模型建模成功;IHC和HPLC检测到Pg感染的AS斑块中Ah R和IDO的表达活性较Pg未感染的AS模型降低。通过qRT-PCR、IHC、HPLC等检测表明使用AhR激动剂干预的Pg感染的AS模型较对照组的主动脉斑块中的AhR、IDO的水平升高,血清中IDO的活性升高;通过流式细胞术、qRT-PCR、油红O染色、Masson染色等技术检测表明AHR干预的模型相比对照组体内Th17/Treg比例降低,主动脉斑块的面积比例降低。结论:Pg可能通过抑制AhR/IDO信号促进Th17/Treg免疫失衡并最终促进ApoE^-/-小鼠动脉粥样斑块形成。更多还原