骨碎补总黄酮通过调节OPG/RANKL轴改善试验诱导的TD肉鸡骨生长

【作者】 徐婷婷； 郑晶晶； 张朝栋； 曹芹芹； 仝宗喜； 黄淑成；

【机构】 河南农业大学动物医学院；

【摘要】 骨碎补是我国常见的一种传统中药,被广泛用于治疗和预防骨病。骨碎补总黄酮(TFRD)是从斛蕨类植物-骨碎补根茎中提取的有效成分,具有补肾固骨、促进骨折愈合、止痛的功效。然而,使用TFRD治疗胫骨软骨发育不良(TD)的试验证据及其潜在机制尚未被研究。本试验中,将240只1日龄肉鸡随机分为六组,分别为正常组、TFRD预防组、TD组、低、中、高剂量TFRD治疗组。所有肉鸡适应3天,第4～7天为造模期,第7～21天为治疗期。在第7、14、21天采取相关样品,通过分析胫骨相关参数,包括胫骨重量、胫骨长度、胫骨中间直径、胫骨上1/3直径、胫骨下1/3直径及其生长板宽度,并进行组织病理学检查来评估胫骨状况。通过Western Blotting和qRT-PCR验证胫骨发育相关基因和蛋白的表达。结果显示:生长性能参数表明TFRD的添加使TD肉鸡跛行减轻、体重增加、生长板宽度变窄、胫骨长度和胫骨中间直径都增加;HE染色结果显示,TD组的胫骨生长板增厚,骨小梁结构被严重破坏、生长板区域几乎无血管浸润。不同剂量的TFRD治疗后,肉鸡生长板宽度变窄、骨小梁的结构完整并排列有序、生长板区域血管分布广泛;qRT-PCR结果显示:与正常组相比,TD组的BMP-2、Runx2、OPG基因和OPG/RANKL比值的表达水平显著降低。与TD组相比,TFRD提高BMP-2、Runx2、OPG基因表达水平和OPG/RANKL比值,500 mg/kg剂量的TFRD治疗效果最佳。Western Blotting结果显示:与正常组相比,TD组的OPG蛋白表达水平和OPG/RANKL比率下降,RANKL的蛋白表达水平上升。与TD组相比,高剂量组(500 mg/kg TFRD)的OPG蛋白表达水平和OPG/RANKL比率上升,RANKL的蛋白表达水平下降。相关性分析发现,生长板宽度与BMP-2、OPG表达水平呈负相关。因此得出结论:TFRD可通过上调OPG/RANKL比值促进TD肉鸡骨的生长,提示TFRD可以作为一种治疗肉鸡TD的潜在中药成分。更多还原