Sirtuin 1通过介导自噬调节猪睾丸间质细胞的睾酮合成

【作者】 于凌云； 贺依静； 刘成荫； 剧世强； 李桥； 周振雷；

【机构】 南京农业大学动物医学院；

【摘要】 (目的)睾丸间质细胞分泌的睾酮在维持雄性第二性征和促进精子成熟中发挥着重要作用,其合成能力强弱则是影响公猪繁殖力的重要因素。因此深入了解LCs睾酮的分泌规律对提高公猪繁殖力意义重大。SIRT1作为哺乳动物生殖细胞内存在的一种去乙酰化酶,能够介导LC3去乙酰化,促进自噬参与各种生理过程。但是自噬是否参与SIRT1调控猪LCs睾酮分泌且潜在机制尚不清楚。NHERF2作为睾酮合成的关键调节蛋白,可通过自噬-溶酶体途径的降解作用促进睾酮合成原料的吸收。因此,本项目旨在探究SIRT1能否通过LC3去乙酰化激活自噬,进而影响睾丸间质细胞内的胆固醇摄取及睾酮合成。(方法)体内试验中,收集4、10和18周猪睾丸组织,通过H.E.染色观察睾丸间质细胞发育情况,ELISA检测睾酮水平,免疫荧光及WB技术检测自噬及胆固醇摄取关键蛋白在不同生长阶段睾丸组织中的动态表达变化,并分析与睾酮分泌之间的关系。细胞试验中,首先探讨了自噬对原代猪睾丸间质细胞睾酮合成的影响,进一步深入研究了SIRT1对自噬及睾酮合成和分泌的调控。(结果)试验结果表明,在睾丸发育过程中,SIRT1蛋白表达及自噬水平升高(P<0.05),NHERF2被降解(P<0.05),胆固醇摄取能力及睾酮分泌增加(P<0.05)。在细胞试验中,SIRT1能够促进LC3由核入质,激活自噬(P<0.05),降解NHERF2 (P<0.05),使得胆固醇摄取能力增强(P<0.05),胞内脂滴数目增加(P<0.05),睾酮合成及分泌升高(P<0.05)。(结论)这些结果表明,SIRT1能够介导自噬参与睾酮合成,并且这个过程是通过降解NHERF2,增加LCs内胆固醇摄取实现的,这些研究结果不仅进一步拓展了对于睾酮分泌调控因素的认识,也为提高公猪雄性生殖能力提供研究方向,为后续寻找潜在的天然药物,治疗雄性哺乳动物繁殖障碍提供了新的靶点。更多还原