柚皮素与阿米卡星联合对耐药大肠杆菌的协同抗菌活性及机制

【作者】 伊蓝坤； 朱阵； 张继瑜；

【机构】 河北工程大学； 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所；

【摘要】 目的细菌耐药性正成为日益严重的问题,开发抗菌增效剂成为控制耐药性的新方向。将现有抗生素与有前景的非抗生素药物相结合是一种已被证明的可以有效克服广泛出现的抗生素耐药性细菌的新策略。本研究旨在探讨柚皮素和阿米卡星对多重耐药大肠杆菌的抗菌协同作用及其潜在机制。方法在本研究中,我们确定了柚皮素联合阿米卡星对多重耐药大肠杆菌的抗菌活性和机制。首先通过棋盘法测量柚皮素与抗生素组合的分数抑制浓度(FIC),然后通过时间杀菌曲线进一步验证了柚皮素与阿米卡星联合的杀菌效果。此外,使用扫描电子显微镜(SEM)观察细胞形态,并通过碱性磷酸酶(AKP)、K+和蛋白质的渗漏来确定柚皮素与阿米卡星联合对大肠杆菌细胞壁和细胞膜的损伤作用。最后通过激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)进一步测定联合组对细胞膜的损伤,确定联合组增强单药抗菌效果的作用机制。结果与讨论本研究测定了柚皮素单独及与抗生素联合使用时对耐药大肠杆菌的体外抗菌效果,结果显示柚皮素与阿米卡星联合使用两者的用量,并且具有更好的杀菌效果。使用时间杀菌曲线进一步证实了该结果。此外,通过扫描电镜和细胞壁、细胞膜损伤试验确定了柚皮素与阿米卡星增强抗菌效果的可能机制。扫描电镜结果显示了大肠杆菌细胞形态的变化和完整性的显着损失,而联合处理后AKP、K+和蛋白质渗出量的显著增加证明了大肠杆菌细胞壁和细胞膜的破坏,进行CLSM以确定细胞膜损伤的程度(通过PI的摄取来测量)。基于这些发现,我们确定柚皮素破坏了大肠杆菌的细胞壁和膜结构,促进阿米卡星进入细胞并发挥抗菌作用。更多还原