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荔枝霜疫霉锌指蛋白PICZF1调控卵孢子形成机制

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【作者】 谢文彬颜冬晓陈永华王文龙段丽娟司徒俊键李敏慧孔广辉姜子德习平根

【机构】 华南农业大学植物保护学院

【摘要】 由荔枝霜疫霉(Peronophythora litchii)引起的荔枝霜疫病是荔枝生产中危害最严重的卵菌病害,常引起落花、落果和大量烂果造成巨大的经济损失。该病原菌卵孢子是其越冬和抵抗逆境的主要方式,也为来年病害的发生提供初侵染源。研究显示,C2H2型锌指蛋白在真核生物体的生长发育、转录调控、有性生殖以及胁迫应答等方面发挥着重要作用。我们通过前期研究发现PlCZF1的敲除突变体的卵孢子形态发生严重异常,导致无法形成正常的卵孢子且致病力显著降低。为进一步明确荔枝霜疫霉菌中PlCZF1的生物学功能及其互作蛋白,本研究利用CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术和聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)介导的原生质体转化技术,对荔枝霜疫霉PlCZF1进行了基因编辑。通过构建过表达载体和融合表达,获取PlCZF1蛋白复合物,经Western Blot和液相色谱与串联质谱(LC-MS/MS)检测,从结果中筛选肽段数比较高的30个候选基因。通过GST pull-down技术进一步筛选出10个分别与PICZF1存在体外互作关系的基因。目前已完成了对Plitchii003609、Plitchii000975、Plitchii004421、Plitchii0020984等4个基因的敲除,通过表型测定分析,其中前3个基因的敲除突变体菌丝生长速率、孢子囊和菌丝形态较野生型无明显差别,Plitchii004421敲除突变体菌丝生长速率较野生型显著降低,孢子囊和菌丝形态较野生型无明显差别,更多表型特征有待进一步观察和测定。研究为进一步探究荔枝霜疫霉锌指蛋白PICZF1调控卵孢子形成和致病性及其病害防控提供了新的靶标。

【关键词】 荔枝霜疫霉PlCZF1互作蛋白卵孢子生长发育
  • 【会议录名称】 中国菌物学会2024年学术年会论文摘要
  • 【会议名称】中国菌物学会2024年学术年会
  • 【会议时间】2024-08-23
  • 【会议地点】中国福建福州
  • 【分类号】S436.67
  • 【主办单位】中国菌物学会
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