热休克蛋白HSPA8抑制禽冠状病毒复制机制初探

【作者】 张焕东； 朱朋朋； 代雪艳； 周继勇； 廖敏；

【机构】 浙江大学动物科学学院；

【摘要】 背景:热休克蛋白(Heat shock proteins,HSPs)包括热休克蛋白成员8 (Heat shock protein member 8,HSPA8)是在大多数真核生物和细菌中发现的一大类伴侣蛋白。它们负责蛋白质正确折叠,保护细胞免受应激压力,刺激产生免疫和炎症因子,调节机体免疫应答等。尽管热休克蛋白主要的生物学功能是维持细胞稳态,在病毒感染的情况下,也会被病毒利用来正确折叠病毒蛋白,在各个阶段辅助病毒完成生命周期,帮助病毒适应和逃逸宿主细胞抗病毒应答,或由宿主利用来直接发挥抗病毒作用等。在前期的研究中我们发现HSPA8可以与禽冠状病毒传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)的纤突蛋白发生互作,并对病毒的吸附有一定的影响作用。但是,HSPA8是否影响IBV病毒的复制尚不清楚。研究目的:探究HSPA8对IBV病毒复制的影响及其分子机制。材料和方法:我们利用细胞内过表达和敲低HSPA8,再感染IBV的方法检测HSPA8对IBV胞内复制的影响。进一步用溶酶体和蛋白酶体抑制剂分别处理细胞,观察HSPA8对IBV复制影响的变化。最后通过CO-IP验证HSPA8对IBV S1蛋白的降解作用。结果:我们发现过表达HSPA8后再感染IBV,IBV基因组和蛋白表达水平均下降,IBV病毒滴度也随之下降;而敲低HSPA8的表达则促进IBV在细胞内复制。进一步的溶酶体抑制剂Baf-A1和NH4Cl处理细胞后可以削弱HSPA8对IBV病毒蛋白合成的抑制作用。进一步的实验结果表明过表达HSPA8不会影响病毒S、N、M、E等结构蛋白的表达,但会抑制S1蛋白的表达,并存在浓度依赖性的抑制作用。结论:HSPA8通过溶酶体自噬途径诱导IBV S1蛋白发生降解从而抑制病毒复制。更多还原