黄芩苷保护牛乳腺上皮细胞免受杀白细胞素诱导的微丝和微管损伤

【作者】 侯玲； 海真真； 周学章；

【机构】 宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室；

【摘要】 研究背景:金黄色葡萄球菌是奶牛乳腺炎的主要致病菌,其毒力因子PV-杀白细胞素(PVL)是金黄色葡萄球菌产生的主要毒力蛋白。近年来,乳腺炎奶牛乳汁中pvl基因的检出率不断升高,证明它是引起奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)损伤的主要原因之一。细胞骨架在奶牛乳腺上皮细胞的泌乳功能中发挥至关重要的作用,细胞骨架的损伤会严重影响泌乳。因此,细胞骨架是乳腺炎干预的潜在靶点。然而,目前尚不清楚PVL是否会损伤奶牛乳腺上皮细胞的细胞骨架,并且这种潜在损伤的分子机制尚未完全了解。方法:采用Western Blot、实时荧光PCR和ELISA等方法检测产PVL的金黄色葡萄球菌标准菌株(ATCC 49775)、pvl基因敲除突变株(Δpvl49775)、回补突变株(C-Δpvl49775)以及重组PVL (rPVL)对奶牛乳腺上皮细胞细胞骨架重排的影响,进而明确黄芩苷对这一病理过程的作用效果及分子机制。结果:金黄色葡萄球菌和rPVL均会损伤奶牛乳腺上皮细胞的细胞骨架,并引起细胞骨架相关蛋白的过度磷酸化。rPVL是通过激活RhoA/ROCK和PI3K/AKT信号通路调控奶牛乳腺上皮细胞微丝和微管骨架的重排,而黄芩苷则通过抑制rPVL引起的RhoA/ROCK和PI3K/AKT通路的激活,减少细胞骨架相关蛋白的过度磷酸化,从而缓解rPVL引起的奶牛乳腺上皮细胞微丝和微管骨架的重排。结论:黄芩苷对PVL诱导的奶牛乳腺炎具有潜在的预防作用。更多还原