mPGES-1/PGE2/EP4途径对大肠杆菌诱导奶牛骨髓源巨噬细胞炎症反应的影响

【作者】 郭莉莉； 刘博； 张双翼； 曹金山； 郭文瑞； 毛伟；

【机构】 内蒙古农业大学；

【摘要】 目的传统非甾体类抗炎药（NSAIDs）能够阻断COX活性以抑制前列腺素（PGE2）的合成,但是由于对环氧化酶-1（COX-1）活性的抑制,常常引发胃肠道的毒副作用。研究发现长期使用选择性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂能够增加患心血管疾病的风险。因此,开发PGE2合成酶mPGES-1和EP4受体为新药物作用靶点的抗炎药降低传统药物的毒副作用成为目前研究的热点。以期建立用于临床奶牛疾病的非甾体抗炎药体外筛选模型,为寻找新的非甾体抗炎药作用靶点奠定了一定基础。材料与方法本试验以体外培养奶牛骨髓源巨噬细胞为研究模型,使用PGE2合成酶mPGES-1抑制剂（MF63、MK886）和EP₄受体抑制剂（grapiprant）预处理奶牛骨髓源巨噬细胞后感染大肠杆菌6h,采用ELISA方法检测IL-6、TNF-α以及PGE₂等炎症相关因子的分泌量。采用实时定量PCR的方法检测巨噬细胞中损伤相关因子高迁移率蛋白-1 （High Mobility Grope Box protein1,HMGB-1）和基质金属蛋白酶9 （MMP-9）基因的表达。采用免疫荧光的方法观察巨噬细胞的吞噬、杀伤作用。结果ELISA结果显示,PGE₂合成酶mPGES-1抑制剂（MF63、MK886）和EP₄受体抑制剂（grapiprant）预处理大肠杆菌感染奶牛骨髓源巨噬细胞后IL-6、TNF-α和PGE₂分泌量显著低于大肠杆菌感染组（P<0.05）。荧光定量PCR结果显示,PGE2合成酶mPGES-1抑制剂（MF63、MK886）和EP₄受体抑制剂（grapiprant）预处理奶牛骨髓源巨噬细胞感染大肠杆菌后HMGB-1和MMP-9基因表达量显著低于大肠杆菌感染组（P<0.05）。免疫荧光结果显示,与大肠杆菌感染组相比,PGE₂合成酶mPGES-1抑制剂（MF63、MK886）和EP4受体抑制剂（grapiprant）预处理奶牛骨髓源巨噬细胞后对大肠杆菌吞噬杀伤作用显著增加（P<0.05）。讨论PGE2参与大肠杆菌所致奶牛骨髓源巨噬细胞炎症的发生,PGE₂合成酶mPGES-1抑制剂（MF63、MK886）和EP₄受体抑制剂（grapiprant）能够减少PGE₂的产生,进而使炎症效果减弱。因此,以mPGES-1抑制剂和EP₄受体抑制剂作为药物作用的新靶点开发效果好、副作用低的非甾体类抗炎药物,并通过研究将其应用于草食家畜相关炎症疾病的治疗中。更多还原