重组乳酸菌喷雾干燥法微胶囊的制备及其在仔猪体内的初步应用

【作者】 王雪莹； 蔡吉垚； 张森豪； 解伟纯； 王晓娜； 崔文； 姜艳平； 周晗； 王丽； 乔薪瑗； 李一经； 唐丽杰；

【机构】 东北农业大学动物医学学院； 农业部动物疫病病原生物学重点实验室东北科学观测实验站；

【摘要】 表达牛乳铁蛋白肽的pPG-LFCA-E/LR-CO21重组罗伊氏乳杆菌具有益生菌和抗菌肽双重特性,为探究以喷雾干燥法制备的重组菌微胶囊作为饲用微生态制剂对仔猪促生长与抗鼠伤寒沙门菌感染的作用。筛选9种复合壁材制备重组菌微胶囊,分析其体外模拟消化性质,比较温度、氧气、湿度条件对重组菌微胶囊贮存期间存活率的影响,并对制备的微胶囊进行微观结构测定。以存活率最高的重组菌微胶囊饲喂新生仔猪3d;饲喂断乳仔猪21d,第14 d时对断乳仔猪口服感染鼠伤寒沙门菌3d,并设置7d的观察期。结果显示,脱脂乳-谷氨酸钠-PVPK-30-麦芽糊精-明胶微胶囊(配方9)表现出了最高的存活率83.56%,保护剂的包埋能提高重组菌在体外模拟消化的存活率。扫描电镜结果发现微胶囊颗粒呈不规则球形,保持了结构的完整性。贮藏154 d后,配方9微胶囊的重组菌活菌数最高,为1010 CFU/g。0.76水分活度条件下重组菌微胶囊存活率下降速度最快,真空环境重组菌微胶囊相较于自然环境中存活率较高,但差异不显著。新生仔猪口服重组菌微胶囊4d后,仔猪小肠仍留存7log CFU/g重组菌。断乳仔猪饲喂重组菌极显著提高了日增重、日采食量,一定程度上减少了仔猪腹泻。感染鼠伤寒沙门菌后,相对于感染组,重组菌组白细胞及中性粒细胞数目极显著降低,总蛋白量极显著提高;显著升高了sIgA、IgA、IgM、IgG水平、炎症因子IL-10、IL-4含量,显著降低IL-1β、IL-6、TNF-α含量,极显著升高抗氧化因子GSH-Px含量,缓解了鼠伤寒沙门菌感染引起的肠黏膜表面破损及炎性细胞浸润的情况。以上结果表明,喷雾干燥法筛选有效包埋剂对重组菌进行包埋,确定以脱脂乳、L-谷氨酸钠、PVPK-30、麦芽糊精、明胶作微胶囊壁材对重组菌喷雾干燥,菌体存活率最高。同时有效延长了重组菌贮存时间。微胶囊化重组菌可有效在仔猪体内定殖,重组菌微胶囊作为促进仔猪健康生长的微生态制剂具有潜在的应用前景。更多还原