O-乙酰高丝氨酸巯基化酶在猪链球菌2型突破血脑屏障过程中的作用研究

【作者】 吴桐； 姜合祥； 刘嘉楠； 李丰阳； 李娜； 刘洪涛； 冯新； 顾敬敏； 雷连成；

【机构】 吉林大学动物医学学院；

【摘要】 O-乙酰高丝氨酸巯基化酶(O-acetylhomoserine sulfhydrylase,MetY/OAHS)是一种吡哆醛5’磷酸化依赖酶,参与微生物甲硫氨酸的生物合成途径。前期研究结果证实猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)菌体表达的OAHS参与SS2感染过程中对宿主血脑屏障的突破,表明其具有调节机体免疫的潜力,但目前尚未有相关报道。为探究OAHS潜在的免疫调节作用,本研究中利用原核表达系统体外纯化OAHS重组蛋白,使用该蛋白对小鼠进行免疫,检测其免疫保护能力;另外,在体外使用该蛋白对脑微血管内皮细胞进行刺激,通过免疫荧光检测OAHS对细胞的粘附作用,通过Western Blot和RT-qPCR检测OAHS对紧密连接和细胞因子表达的影响。结果显示,纯化的OAHS对SS2感染小鼠具有良好的免疫保护效果;OAHS能够粘附在脑微血管内皮细胞表面,在OAHS的作用下,紧密连接基因的转录及蛋白表达水平均升高,同时伴随着炎性细胞因子转录水平升高。综上,本研究表明OAHS具有良好的免疫原性,具有一定的应用潜力,同时也为针对性的开发抗SS2感染疫苗和抗体制备提供理论参考。更多还原