核糖体蛋白SA和波形蛋白复合体介导猪链球菌2型烯醇化酶抑制人脑微血管内皮细胞ZO-1蛋白的表达

【作者】 姜合祥； 刘嘉楠； 吴桐； 鲍春彤； 李丰阳； 李娜； 雷连成；

【机构】 吉林大学动物医学学院；

【摘要】 猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)是一种重要的人畜共患病原菌,其感染可导致宿主脑膜炎等疾病,严重威胁人畜健康。烯醇化酶(Enolase,ENO)是SS2的重要毒力因子,团队前期研究发现ENO通过与猪脑微血管内皮细胞(Porcine brain microvascular endothelial cells,PBMEC)核糖体蛋白SA (RPSA)互作,抑制紧密连接蛋白ZO-1的表达,破坏血脑屏障BBB,但对其相关机制的认识依旧不足。本研究通过蛋白免疫印迹(western blot,WB)、免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)、RNA干扰和免疫荧光等方法,揭示RPSA在SS2 ENO抑制人脑微血管内皮细胞(human cerebral microvascular endothelial cells,HCMECs) ZO-1表达的机制。结果发现,在SS2感染HCMECs后,RPSA和中间丝蛋白(VIM)在质膜高表达,而且能够共定位,相互作用形成复合体。体外添加ENO重组蛋白,能够诱导HCMECs RPSA蛋白水平显著增加;RPSA增加则通过促进VIM的蛋白表达,显著增强RPSA和VIM的相互作用,形成稳定的复合体,从而抑制了ZO-1的蛋白水平。本研究首次证明了RPSA-VIM在胞膜以复合体的形式共同参与SS2感染抑制宿主细胞紧密连接蛋白表达,为深入揭示SS2感染诱发脑膜炎的致病机制补充了新的认识。更多还原