小柴胡汤对体外培养LX-2细胞增殖的影响及机制初探

【作者】 卢金； 朱恬宇； 张英； 许永良； 吴奇俊； 刘新建； 黄玉政；

【机构】 江苏省血吸虫病防治研究所,国家卫生健康委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室； 南京医科大学热带病研究中心； 江南大学公共卫生研究中心； 南京中医药大学附属无锡中医医院； 南京医科大学病原生物学系；

【摘要】 目的:观察小柴胡汤对人肝星状细胞(LX-2细胞)增殖的影响。方法:体外培养LX-2细胞,用不同浓度的小柴胡汤(2%,1%,0.5%,0.2%,0.1%)处理24h,对照组不做处理。显微镜下观察药物作用后细胞形态改变,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(Edu)法检测细胞增殖,实时荧光定量PCR (RT-PCR)检测Ⅰ型胶原(COL-I) mRNA的表达情况。结果:对照组细胞,贴壁生长良好,形态未见明显异常。经不同浓度小柴胡汤(2%、1%、0.5%、0.2%、0.1%)处理24 h后,LX-2细胞均出现皱缩,变圆,界限不清,细胞核固缩等不同程度形态改变,MTT检测显示其增殖抑制率分别为100%、54.9%、41.2%、14.8%、12.4%。经1%、0.5%、0.1%小柴胡汤作用24h后,Edu法检测LX-2细胞增殖率分别为0.1%、5.3%、10.1%;RT-PCR检测其COL-I mRNA的表达量,与对照组1.04±0.35相比,均显著下降,分别为0.45±0.15 (P<0.05)、0.27±0.16 (P<0.01)和0.38±0.24 (P<0.01)。MTT和Edu结果表明小柴胡汤能够抑制体外培养LX-2细胞的增殖,并呈剂量依赖效应。结论:小柴胡汤通过抑制LX-2细胞增殖,并抑制COL-I mRNA的表达,从而发挥抗纤维化活性。更多还原