捻转血矛线虫三期到四期发育阶段体外培养条件初探

【作者】 刘璐； 王春群； 周彩显； 瓦热斯； 刘慧； 刘峰； 叶丽莎； 张耀； 胡敏；

【机构】 农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院；

【摘要】 捻转血矛线虫是寄生于反刍动物皱胃的吸血性寄生线虫,常导致宿主腹泻、消瘦、贫血甚至死亡,给牛羊养殖业带来巨大的经济损失。近年来关于其抗药性的文章在多地均有报道,因此急需挖掘新的药物靶标和疫苗候选抗原。由于缺乏可用的体外遗传操作系统,这些重要分子功能的研究受到极大限制。本研究旨在探索体外培养从感染性三期到寄生性四期阶段的虫体,以建立适合其发育的体外培养系统。多年来捻转血矛线虫的体外培养一直停滞于寄生阶段的四期早期,即相当于体内感染后的2天左右,本研究配置了一种新型的混合培养基使脱鞘三期幼虫在体外培养20天后,与感染后体内发育4-6天相似。在此培养系统中,幼虫体长达900μm,体宽达30μm;生殖原基由两个细胞发育至12个细胞左右;肠道发育为管状;可以初步区分雌雄虫。通过提高新型培养基中脱纤维蛋白血的含量,在体外培养20天后,20%幼虫发育至与体内8天幼虫相似。此时可以清晰的观测到生殖系统各部分器官,雌虫各器官清晰可辨;并与消化系统交互缠绕。本体外培养系统可使四期早期在体外发育至四期中后期,在前人培养系统的基础上有了长足的进步,为日后完成完整的寄生阶段虫体的体外培养系统打下了初步的基础。更多还原