tiRNA-Val-CAC-002在OSF中的表达及其对FB活化的影响

【作者】 孙磊叶； 彭慧； 喻晖乔； 吴颖芳；

【机构】 中南大学湘雅医院口腔医学中心；

【摘要】 目的:槟榔碱所致的成纤维细胞(Fibroblast,FB)活化是口腔黏膜下纤维性变(Oral submucous fibrosis,OSF)发病过程中重要的病理现象。本课题组前期研究证实,tiRNA-Val-CAC-002在OSF中差异表达,但其与FB活化的关系尚未明了。本课题旨在探究tiRNA-Val-CAC-002对FB活化的影响及其作用机制,以期进一步阐明OSF的发病机制,为防治OSF探寻新的有效靶点。方法:(1)利用RT-qPCR检测OSF组织中tiRNA-Val-CAC-002的表达水平。(2)利用RT-q PCR检测不同浓度槟榔碱刺激的FB中tiRNA-Val-CAC-002的表达水平。(3)利用Western Blot检测槟榔碱刺激FB后FB活化相关蛋白(α-SMA)及胶原蛋白(CollagenⅠ/Ⅲ)的表达水平。(4)转染tiRNA-Val-CAC-002模拟物(mimic)/抑制物(inhibitor),利用Western Blot检测tiRNA-Val-CAC-002对槟榔碱刺激的FB活化相关蛋白(α-SMA)及胶原蛋白(CollagenⅠ/Ⅲ)的表达水平。结果:(5) RT-qPCR显示,OSF组织中tiRNA-Val-CAC-002表达上调(P<0.05)。(6) RT-qPCR显示,随着槟榔碱浓度增加,FB中tiRNA-Val-CAC-002表达逐渐上调(P<0.05)。(7) Western Blot结果显示:与对照组相比,槟榔碱刺激FB后,α-SMA及collagenⅠ/Ⅲ蛋白的表达量增加(P<0.01)。(8)抑制tiRNA-Val-CAC-002可逆转槟榔碱导致的FB中α-SMA及collagenⅠ/Ⅲ蛋白的高表达(P<0.05)。结论:OSF组织及槟榔碱刺激FB中tiRNA-Val-CAC-002高表达,并且槟榔碱可以通过上调tiRNA-Val-CAC-002促进FB活化。更多还原